【摘 要】
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目的:探索一种新型体外分离培养新生大鼠骨骼肌成肌细胞的途径。方法:取新生W istar大鼠的四肢骨骼肌适量,采用混合酶一步消化分离获取成肌细胞,将差速贴壁法和胰酶消化法相
【机 构】
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辽宁医学院第一附属医院骨科; 军事医学科学院基础医学研究所; 辽宁医学院第一附属医院骨科 辽宁锦州121001; 北京100850; 辽宁锦州121001;
【基金项目】
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第38期中国博士后科学基金(2005038055);辽宁省科学技术计划项目基金(2005225003-14);辽宁省自然科学基金(20052204)
论文部分内容阅读
目的:探索一种新型体外分离培养新生大鼠骨骼肌成肌细胞的途径。方法:取新生W istar大鼠的四肢骨骼肌适量,采用混合酶一步消化分离获取成肌细胞,将差速贴壁法和胰酶消化法相结合进行纯化,观察分离纯化成肌细胞的形态学特点、生长状况,绘制细胞生长曲线,利用扫描电镜观察成肌细胞表面结构并进行结蛋白免疫细胞化学特异性鉴定。结果:采用改良方法分离成肌细胞产量高、耗时短;在培养过程中双重纯化获取的细胞生长状态良好,接种后3~5 d增殖达高峰;在扫描电镜下可观察到成肌细胞膜表面有微绒毛突起;体外培养的成肌细胞中94%的细胞胞质呈结蛋白抗体染色强阳性。结论:改良方法分离纯化大鼠骨骼肌成肌细胞效果理想,是成肌细胞体外培养的有效途径之一。
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