【摘 要】
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为提高口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)的特异性识别和递呈,为靶向疫苗研究奠定基础,利用反向PCR技术,将卵清蛋白(Ova
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室OIE/国家口蹄疫参考实验室,甘肃兰州730046
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为提高口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)的特异性识别和递呈,为靶向疫苗研究奠定基础,利用反向PCR技术,将卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)第257-264位氨基酸(Amino acids,aa)的短肽嵌入FMDV结构蛋白VP3第171-172位aa或第173-174位aa,通过大肠杆菌表达FMDV结构蛋白VP0、VP1和嵌合型VP3,体外组装得到嵌合OVA257.264肽的病毒样颗粒(VLPOVA).用动态光散射、透射电镜检测VLPOVA大小和形态,免疫印迹、酶联免疫吸附试验和激光共聚焦显微镜检测短肽的嵌入情况.结果 显示在VP3的第173-174位aa嵌入OVA,不影响蛋白表达和VLPs的组装且OVA位于VLPOVA的表面,VLPOVA粒径比VLPs稍大.
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