【摘 要】
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OBJECTIVE:To explore the effects of Qing-guang'an(青光安)containing serum on the expres-sion levels of autophagy related genes in the trans-forming growth facto
【机 构】
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Ophthalmology Department,the First Affiliated Hospital,Hunan University of TCM,Changsha 410007,Chi-n
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OBJECTIVE:To explore the effects of Qing-guang'an(青光安)containing serum on the expres-sion levels of autophagy related genes in the trans-forming growth factor beta 1(TGF-β1)-activated human Tenon's fibroblasts(HTFs).METHODS:(a)Primary HTFs were stimulated by TGF-β1 and underwent immunohistochemistry,which established a cell model after Glaucoma fil-tration surgery(GFS).(b)The cell models were di-vided into 4 group:normal group(normal cells),model group(+TGF-β1),treatment group(+TGF-β1+medicated serum),and positive control group(TGF-β1+rapamycin).Then,Qingguang'an medicat-ed serum with optimum concentration was added to the corresponding group.The autophagy posi-tive cells were identified by the Cyto-ID autophagy detection kits under fluorescent microscope and Cytation 5 multifunctional instrument for cell imag-ing.And the mean fluorescence intensity of autoph-agy positive cells was determined by flow cytome-try.The expression levels of autophagy related genes—Beclin-1,autophagy related gene 5(ATG-5),and microtubule-associated protein 1 light chain 3(LC-3 Ⅱ)were detected by quantitative re-verse transcription-polymerase chain reaction and Western blot analysis.RESULTS:Compared with the normal group and the model group,the relative mRNA expression lev-els of autophagy-related genes(Beclin-1,ATG-5 and LC-3 Ⅱ)in the experimental group were nota-bly increased(P＜0.05,P＜0.01),and with the ex-tension of treatment time,it had an increasing trend(48 h was more obvious),which showed a cer-tain time dependency;the protein expression lev-els of autophagy-related genes(Beclin-1,ATG-5,and LC-3 Ⅱ)were significantly increased in the ex-perimental group(P＜0.05,P＜0.01).With the pro-longation of treatment time,there was an increas-ing trend(48 h was relatively obvious),and it re-vealed a certain time dependency.CONCLUSION:The Qingguang'an medicated se-rum could up-regulate autophagy related genes(Beclin1,ATG5,and LC3 Ⅱ)in the TGF-β1-activated HTFs.
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