^35S标记重组人GAD65抗原检测糖尿病患者GAD—Ab指数

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目的建立一种新的谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)检测方法.方法采用重组人GAD65 质粒,经试管内转录与翻译,获得35S-GAD65抗原,35S-GAD65与血清在自制旋转孵育器上旋转保温,以蛋白质A-琼脂糖作为沉淀剂,用计数仪测沉淀物放射性计数,以GAD-Ab指数>0.05作为阳性标准,并检测43例1型和226例2型糖尿病患者,以及109例正常对照者的GAD-Ab水平.结果检测条件优化:采用SJ1515型35S-蛋氨酸进行试管内转录与翻译,自制旋转孵育器转速控制在20~30 r/ min,操作环境
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