一种新型重组人复合α干扰素的表达、分离纯化及活性测定

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【摘要】

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为提高重组复合α干扰素的活性和半衰期,在现有复合α干扰素结构基础上进行氨基酸替换,合成了新型干扰素(N-cIFN)基因,将该基因克隆到温控表达质粒pBV220,转化大肠杆菌BL21获

【作者】

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金茜陈紫娟徐旭东

【机构】

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中国药科大学生命科学与技术学院,江苏,南京,210009;东南大学医学院,江苏,南京,210009

【出处】

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药物生物技术

【发表日期】

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2011年1期

【关键词】

：

重组人cIFN 温控表达分离纯化活性

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为提高重组复合α干扰素的活性和半衰期,在现有复合α干扰素结构基础上进行氨基酸替换,合成了新型干扰素(N-cIFN)基因,将该基因克隆到温控表达质粒pBV220,转化大肠杆菌BL21获得工程菌BL21/pBV220-cIFN,经过诱导表达、包涵体变性、DEAE Sephadex A-25柱层析、Sephadex G-50柱层析以及离心超滤等分离纯化过程,获得纯度为92%的重组人复合α干扰素,对其效价测定结果显示其体外活性为9×108 IU/mg.

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