【摘 要】
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目的 通过体外观测柯萨奇病毒B3(CVB3)感染后髓系触发受体-1(TREM-1)在巨噬细胞中的表达,进一步探讨病毒性心肌炎炎症损伤的作用机制.方法 CVB3感染巨噬细胞后,按感染时间进
【机 构】
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复旦大学附属中山医院 上海市心血管病研究所 卫生部病毒性心脏病重点实验室
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目的 通过体外观测柯萨奇病毒B3(CVB3)感染后髓系触发受体-1(TREM-1)在巨噬细胞中的表达,进一步探讨病毒性心肌炎炎症损伤的作用机制.方法 CVB3感染巨噬细胞后,按感染时间进行分组,检测各组TREM-1 mRNA的转录情况(具体分为0h、1h、4h、8h和12 h组),免疫印迹法检测TREM-1及其下游分子DAP-12蛋白的表达(具体分为0h、16h、24h和48 h组),用LP-17阻断TREM-1作为干预组,与单纯CVB3感染组(24h)和不感染CVB3的对照组比较,酶联免疫吸附法检测巨噬细胞分泌蛋白肿瘤坏死因子α(TNF-α)的量,用CCK8和Annexin V-FITC观察与巨噬细胞上清共培养后的心肌细胞的活力和凋亡.结果 CVB3感染后4h组TREM-1 mRNA表达量高于0h组(但差异无统计学意义),8 h组和12 h组则显著高于0h组(P均＜0.01),16 h组和24h组TREM-1蛋白表达水平显著高于0h组(P均＜0.01).CVB3感染24h组和48 h组TREM-1的下游信号分子DAP-12的蛋白表达也显著高于0h组(P均＜0.01).LP-17干预组巨噬细胞分泌的TNF-α的量明显少于CVB3感染组(24 h)(P＜0.01).LP-17干预组心肌细胞的活力显著高于CVB3感染组(24 h)(P＜0.01),细胞凋亡少于CVB3感染组(24 h)(P ＜0.01).结论 CVB3通过诱导巨噬细胞中TREM-1的表达产生过度的炎症反应,进一步引发心肌细胞的间接损伤是急性病毒性心肌炎的发病机制之一.
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