【摘 要】
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目的 利用酵母单杂交系统筛选与Cltb基因启动子结合的顺式元件,获得调控Chb基因表达的转录因子,阐明Cltb基因的转录调控机理。方法 首先,构建表达Chb调控序列的诱饵质粒pBait—A
【机 构】
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第三军医大学新桥医院全军呼吸病研究所,广东医学院生理学教研室
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目的 利用酵母单杂交系统筛选与Cltb基因启动子结合的顺式元件,获得调控Chb基因表达的转录因子,阐明Cltb基因的转录调控机理。方法 首先,构建表达Chb调控序列的诱饵质粒pBait—AbAi,并将诱饵质粒转入Y1HGold菌株,构建可稳定表达“诱饵一报告子”的酵母菌株;然后,运用SMART。”技术构建小鼠肺组织酵母单杂交cDNAAD融合表达文库,并进行cDNA文库的筛选。结果 成功构建了筛选Cltb启动子顺式元件结合蛋白的酵母单杂交文库,该文库的转化效率为:9.35×10^5CFU/μg。通
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