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【摘要】微生物临床检验是一门实践操作性很强的学科。为了能够得到快速而准确临床诊断结果，必须从标本采集、标本验收、显微镜检查、药敏试验各个环节严格把关，不断提高微生物检验的临床应用技术水平。
【关键词】微生物；检验；细菌学
微生物临床检验是一门实践操作性很强的学科。随着医学检验技术的进步发展，微生物检验人员除了要具备扎实的医学理论知识，还必须积累丰富的实践操作经验，与临床密切结合，确保能够得到快速而准确的診断结果。本文将结合多年工作经验，对微生物检验在临床上的应用问题进行了总结，现汇报如下。1标本采集
标本采集是在微生物检验工作的第一步。如果这项工作没有做好，以后所做的一切都是在浪费精力，甚至会误导的临床用药。在临床上标本提交量最多的有血液、尿液、粪便、痰、脓等。每种标本的采集应严格遵循标准采集程序。
1.1血液标本血液标本通常在临床医生对患者使用抗生素前或停药24h后采集。成人应采血量为8-10ml，儿童为1-5ml，并24h内于不同部分采集2-3份血样。对于一些特定疾病，如间歇寒战或发烧患者，在体温峰值来前0.5-1h前或寒战发热后1h采血2份以上。对有疑似细菌性心内膜炎的患者，在1-2h内采集3份标本，24h阴性时再采集了三个以上的血液样本。
1.2尿液标本患者睡前少饮水，最好是留取晨尿中段的标本。采集前女性用手分开大阴唇，男性要翻上包皮，用肥皂仔细清洗会阴部，然后再水冲洗尿道周围。取10-20ml的中段尿液到无菌容器中。
1.3粪便标本实际工作中收集粪便标本经常使用棉花棒。其实这是一个非常不科学的做法。因为总是会吸附有大量的有效成分，包括细菌、白细胞、原虫卵等，使细菌培养的阳性率大大降低。因此，应告知患者收集颜色和性状比较独特粪便标本直接放到无菌容器中。
1.4痰标本在医生给予抗生素治疗前或停药24h后采集标本。患者早上先用水漱口2-3次，取由深部咳出的第2口痰，用无菌容器封装。
1.5脓汁标本采集标本可分为内源性和外源性。内源性标本可以取病理切片在无菌操作条件下进行；外源性标本则一定要取脓肿部位深部的脓液标本。
注：各种标本的采集量不应过少，而且要具有代表性，同时有些标本还要注意不同时间采集不同部位标本。如肠热症患者，发病的第一周应采集血液，第二周应采集粪便和尿液，否则影响细菌检出率。2标本验收
2.1血液标本重点关注血量要符合要求，且未受到污染或有泄漏、破裂等情况。
2.2尿液标本特别注意无菌容器塞是否紧固或被尿液浸泡。
2.3粪便标本主要留意其颜色、性质。若容器外有粪便可能导致标本被污染，应要求患者重新采集。
2.4痰标本可采用直接涂片或涂片革兰染色镜检查。痰涂片镜检的合格标准是：WBC>25个/低倍镜视野，鳞状上皮细胞<10个/低倍镜视野。
2.5脓汁标本根据临床需要采集，无菌送检。3显微镜检查
对验收后标本进行革兰染色，一方面能够掌握采集标本的质量，以确定是否要对其培养或是另外重新留取标本；另一方面，通过镜检可初步对某些细菌作出分类。也就是说，首先实施对原始标本染色和非染色涂片的显微镜检查，对下一步检验工作做出方向性的判断。男性尿道和女性尿道分泌物涂片经革兰染色后，若发现白血细胞内部或外部有革兰阴性双球菌，是初步诊断为淋病的重要依据；粪便中的球杆菌比例检查，对肠道菌群失调的诊断具有重要的帮助；痰液，胸腔积液涂片抗酸染色检验抗酸杆菌，对肺结核的诊断具有十分重要的意义。4药敏试验
在我国住院患者中约有80%的患者接受抗生素治疗，其中根据药敏试验结果选择抗生素的患者仅占14%，也就是说约有86%的患者是根据医生经验给予抗生素治疗的。因此，检验人员必须快速做出药敏试验结果以满足临床的需要。在进行试验时，可直接将临床标本接种于平板，用抗生素纸片作药物敏感性试验，在18-24h内可获得结果，这样能提前得到了药敏结果报告，为患者争取更多的治疗时机。对细菌的分离应配套使用培养基，以避免出现漏检的情况。这样可以在2h内得到直接涂片所见，24h初步报告可能的病原菌和直接药敏的结果，细菌的最后鉴定结果和药敏试验结果应在72h之内报告完毕（血培养除外）。
总之，微生物检验的结果为临床诊断提供了重要的参考依据。只有通过广大检验专业人员长期、大量、细致的工作，才能不断提高检验质量，为临床诊断治疗和患者的早日康复做好服务。
参考文献
[1]张卓然.临床微生物学和微生物检验[M].北京：人民卫生出版社，2004.100.01.233，468.
[2]王睿.细菌耐药机制与临床治疗对策[J].国外医学抗生素分册，2013，（3）.
[3]谭轩.从检验角度谈检验与临床的关系[J].检验医学与临床，2009（22）.
[4]谭明凤.血液标本不合格因素分析及解决方法[J].实用中医药杂志，2010（11）.
【关键词】微生物；检验；细菌学
微生物临床检验是一门实践操作性很强的学科。随着医学检验技术的进步发展，微生物检验人员除了要具备扎实的医学理论知识，还必须积累丰富的实践操作经验，与临床密切结合，确保能够得到快速而准确的診断结果。本文将结合多年工作经验，对微生物检验在临床上的应用问题进行了总结，现汇报如下。1标本采集
标本采集是在微生物检验工作的第一步。如果这项工作没有做好，以后所做的一切都是在浪费精力，甚至会误导的临床用药。在临床上标本提交量最多的有血液、尿液、粪便、痰、脓等。每种标本的采集应严格遵循标准采集程序。
1.1血液标本血液标本通常在临床医生对患者使用抗生素前或停药24h后采集。成人应采血量为8-10ml，儿童为1-5ml，并24h内于不同部分采集2-3份血样。对于一些特定疾病，如间歇寒战或发烧患者，在体温峰值来前0.5-1h前或寒战发热后1h采血2份以上。对有疑似细菌性心内膜炎的患者，在1-2h内采集3份标本，24h阴性时再采集了三个以上的血液样本。
1.2尿液标本患者睡前少饮水，最好是留取晨尿中段的标本。采集前女性用手分开大阴唇，男性要翻上包皮，用肥皂仔细清洗会阴部，然后再水冲洗尿道周围。取10-20ml的中段尿液到无菌容器中。
1.3粪便标本实际工作中收集粪便标本经常使用棉花棒。其实这是一个非常不科学的做法。因为总是会吸附有大量的有效成分，包括细菌、白细胞、原虫卵等，使细菌培养的阳性率大大降低。因此，应告知患者收集颜色和性状比较独特粪便标本直接放到无菌容器中。
1.4痰标本在医生给予抗生素治疗前或停药24h后采集标本。患者早上先用水漱口2-3次，取由深部咳出的第2口痰，用无菌容器封装。
1.5脓汁标本采集标本可分为内源性和外源性。内源性标本可以取病理切片在无菌操作条件下进行；外源性标本则一定要取脓肿部位深部的脓液标本。
注：各种标本的采集量不应过少，而且要具有代表性，同时有些标本还要注意不同时间采集不同部位标本。如肠热症患者，发病的第一周应采集血液，第二周应采集粪便和尿液，否则影响细菌检出率。2标本验收
2.1血液标本重点关注血量要符合要求，且未受到污染或有泄漏、破裂等情况。
2.2尿液标本特别注意无菌容器塞是否紧固或被尿液浸泡。
2.3粪便标本主要留意其颜色、性质。若容器外有粪便可能导致标本被污染，应要求患者重新采集。
2.4痰标本可采用直接涂片或涂片革兰染色镜检查。痰涂片镜检的合格标准是：WBC>25个/低倍镜视野，鳞状上皮细胞<10个/低倍镜视野。
2.5脓汁标本根据临床需要采集，无菌送检。3显微镜检查
对验收后标本进行革兰染色，一方面能够掌握采集标本的质量，以确定是否要对其培养或是另外重新留取标本；另一方面，通过镜检可初步对某些细菌作出分类。也就是说，首先实施对原始标本染色和非染色涂片的显微镜检查，对下一步检验工作做出方向性的判断。男性尿道和女性尿道分泌物涂片经革兰染色后，若发现白血细胞内部或外部有革兰阴性双球菌，是初步诊断为淋病的重要依据；粪便中的球杆菌比例检查，对肠道菌群失调的诊断具有重要的帮助；痰液，胸腔积液涂片抗酸染色检验抗酸杆菌，对肺结核的诊断具有十分重要的意义。4药敏试验
在我国住院患者中约有80%的患者接受抗生素治疗，其中根据药敏试验结果选择抗生素的患者仅占14%，也就是说约有86%的患者是根据医生经验给予抗生素治疗的。因此，检验人员必须快速做出药敏试验结果以满足临床的需要。在进行试验时，可直接将临床标本接种于平板，用抗生素纸片作药物敏感性试验，在18-24h内可获得结果，这样能提前得到了药敏结果报告，为患者争取更多的治疗时机。对细菌的分离应配套使用培养基，以避免出现漏检的情况。这样可以在2h内得到直接涂片所见，24h初步报告可能的病原菌和直接药敏的结果，细菌的最后鉴定结果和药敏试验结果应在72h之内报告完毕（血培养除外）。
总之，微生物检验的结果为临床诊断提供了重要的参考依据。只有通过广大检验专业人员长期、大量、细致的工作，才能不断提高检验质量，为临床诊断治疗和患者的早日康复做好服务。
参考文献
[1]张卓然.临床微生物学和微生物检验[M].北京：人民卫生出版社，2004.100.01.233，468.
[2]王睿.细菌耐药机制与临床治疗对策[J].国外医学抗生素分册，2013，（3）.
[3]谭轩.从检验角度谈检验与临床的关系[J].检验医学与临床，2009（22）.
[4]谭明凤.血液标本不合格因素分析及解决方法[J].实用中医药杂志，2010（11）.