【摘 要】
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目的 建立沙眼衣原体实时荧光定量PCR检测技术,以期用于沙眼衣原体的感染检测. 方法 针对沙眼衣原体ompA基因序列保守区域设计引物和TaqMan探针,构建标准质粒并制作标准曲线,
【机 构】
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南方医科大学公共卫生学院,广东广州510515;广东省热带病研究重点实验室;南方医科大学公共卫生学院,广东广州,510515;深圳市疾病预防控制中心
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目的 建立沙眼衣原体实时荧光定量PCR检测技术,以期用于沙眼衣原体的感染检测. 方法 针对沙眼衣原体ompA基因序列保守区域设计引物和TaqMan探针,构建标准质粒并制作标准曲线,建立沙眼衣原体实时荧光定量检测方法,通过对人型支原体等的检测评价方法的特异性.结果 建立的沙眼衣原体荧光定量PCR体系能特异性检测沙眼衣原体,与人型支原体、解脲脲原体、淋球菌、大肠埃希菌EDL933、金黄色葡萄球菌无交叉反应;标准曲线在3.9×109～3.9×103 copies/μl之间线性关系良好(r2=0.99);方法的灵敏度高,检测最低拷贝数为3.9 copies/μl;组内及组间变异系数均＜5％. 结论 建立的检测沙眼衣原体实时定量PCR方法特异、灵敏,可用于沙眼衣原体感染的早期筛查和临床快速诊断.
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