人淋巴毒素基因5′端上游NF-KB类因子特异性结合位点的研究

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淋巴毒素(Lymphotoxin,LT)是由活化的T淋巴细胞分泌的一种糖蛋白。LT基因的表达调控主要是在转录水平上。PHA+PMA诱导的Jurkat细胞总RNA点渍杂交发现,Jurkat细胞的内源性LTmRNA的数量随诱导时间的延长而增加。凝胶迟滞电泳分析发现,PHA+PMA诱导4小时的Jurkat细胞核抽提物形成多种复合物,且在诱导不同时间后有明显变化。系列缺失片段的竞争反应表明,这些复合物的形成与LT基因5'端上游──128bp──93bp左右的序列相关。DNasel足迹法及其竞争实验发现,LT基因5'端上游─—104bp──83bp(共22bp)序列具有明显的蛋白质保护足迹。同源性分析发现此22bp的序列中存在一个KB样结合位点:─100bp──90bp(5’-GGGGGCTTCCC-3’)。NP-KB类蛋白质因子参与了此序列的DNA-蛋白质的特异性结合,可能存在多种类型的NP-KB类蛋白因子参与了LT基因的表达调控。
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