【摘 要】
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以PCV2PK-15细胞毒提取的DNA为模板，用PCR扩增PCV20RF2基因的后部约600bp片段；对PCR产物回收纯化后与载体pMD19-T进行连接、转化，经酶切和序列分析后亚克隆到原核表达载体pET-32
【基金项目】
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河北省科技厅重大项目(06220401D-4)
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以PCV2PK-15细胞毒提取的DNA为模板，用PCR扩增PCV20RF2基因的后部约600bp片段；对PCR产物回收纯化后与载体pMD19-T进行连接、转化，经酶切和序列分析后亚克隆到原核表达载体pET-32a中，构建重组表达质粒pET-32a-ORF2，转入大肠埃希氏菌BL21（DE3）中，以IPTG诱导表达，进行SDS—PAGE电泳和Western—Blotting分析。结果表明，重组表达质粒在大肠中所表达的融合蛋白相对分子量为40kDa，Western—blotting分析表明该蛋白具有PCV2抗
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