兔骨髓间充质干细胞的分离培养及成骨分化的实验研究

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目的观察兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的生物学特性及成骨分化潜能,为骨组织工程(BTE)临床应用提供实验基础。方法抽取兔骨髓(BM),采用密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离培养兔BMSCs,通过流式细胞术(FCM)鉴定第3代(P3)BMSCs表面抗原CD44、CD45。随机将BMSCs分为实验组及对照组,实验组行成骨诱导培养,对照组行常规培养。实验组诱导3 w后行碱性磷酸酶(ALP)染色及茜素红染色,对照组常规培养后染色。结果密度梯度离心法结合贴壁筛选法可获得BMSCs,流式细胞术显示BMSCs高表达CD44(96.8%),低表达CD45(0.8%)。成骨诱导后细胞形态改变,茜素红染色可观察到矿化结节;ALP染色见细胞出现深蓝色钙化结节影。结论密度梯度离心法结合贴壁筛选法可较好的分离培养兔BMSCs。BMSCs经成骨诱导后向成骨细胞分化,可作为BTE理想的种子细胞。
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