抑制性消减杂交技术筛选乙型肝炎病毒核心蛋白相互作用蛋白编码基因C1的反式调节基因

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zzjokok
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目的:筛选、克隆与乙型肝炎病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)相互作用的蛋白基因C1的反式激活基因,探索该基因可能的生物学功能.方法:以分子生物学技术构建C1真核表达载体pcDNA3.1(-)-C1,以表达质粒pcDNA3.1(-)-C1转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)转染的HepG2细胞为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaⅠ酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PC
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