转化生长因子β1反义RNA对肾小球系膜细胞基质合成及分泌的影响

来源 :中华肾脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:loogog
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目的观察转化生长因子beta 1(TGF-β1)反义RNA对系膜细胞基质合成的影响.方法构建含TGF-β1反义RNA的重组腺病毒,将重组腺病毒转染系膜细胞,用Northern blot检测转染系膜细胞TGF-β1及ColⅣmRNA的含量,用免疫组化半定量分析转染的系膜细胞中TGF-β1、纤连蛋白(FN)及胶原(Col)Ⅳ蛋白水平,并与无转染的系膜细胞对照组比较其表达的变化.结果构建了含TGF-β1反义RNA的重组腺病毒.重组反义TGF-β1腺病毒转染系膜细胞后,与对照组相比,在第24hTGF-β1及ColⅣ的mRNA无明显抑制,在48 h TGF-β1及ColⅣmRNA抑制率分别为22.5%,18.2%;72 h TGF-β1及ColⅣmRNA抑制率分别为29.5%,27.3%.免疫组织化学半定量结果显示:与对照组相比,在48 h始转染系膜细胞TGF-β1、FN及ColⅣ蛋白含量开始下降,48 h TGF-β1、FN及ColⅣ蛋白抑制率分别为16.5%,18.2%及14.6%;72 h TGF-β1、FN及ColⅣ蛋白抑制率分别为23.5%,27.3%及26.8%.结论重组反义TGF-β1可抑制系膜细胞合成细胞外基质,在肾小球肾炎及肾小球硬化的研究及治疗中有潜在的应用价值.
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