【摘 要】
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目的:利用新型诱导剂钙离子载体A23187联合重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)体外诱导人外周血单核细胞(PBMC)生成树突状细胞(DCs).方法:采用密度梯度离心法及黏
【机 构】
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广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科,广东省人民医院消化内科
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目的:利用新型诱导剂钙离子载体A23187联合重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)体外诱导人外周血单核细胞(PBMC)生成树突状细胞(DCs).方法:采用密度梯度离心法及黏附法分离出PBMC,按不同培养方法分成:传统方法组,rhGM-CSF+重组人白介素-4(rhIL-4)+重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α);新型诱导剂组,加入rhGM-CSF+A23187.光镜观察细胞形态的变化,流式细胞仪检测DC细胞的表面标志,MTT比色法检测各组DCs刺激同种异体外周血T细胞增殖的能力.结果:与传统方法相比,A23187联合rhGM-CSF诱导培养的DCs更具有典型的树突形态;DC表面分子CD83D1a、CD86、CD40表达(45.2%、31.5%、40.1%、36.4%)较传统方法组(16.9%、20.4%、26.5%、22.3%)明显上调(P<0.05),而CD14表达(5.7% vs 19.0%)明显下降(P<0.05),刺激同种异体T细胞增殖的能力更强.结论:新型诱导剂钙离子载体A23187联合GM-CSF能更有效地诱导PBMC生成强效成熟的DCs.
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