表皮生长因子受体胞外区的原核表达和鉴定

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目的克隆表皮生长因子受体(EGFR)胞外区段基因序列(EGFRECD),构建重组融合表达载体。方法采用常规PCR方法扩增EGFR的胞外区DNA序列,并将扩增产物克隆入GST融合表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒pGEX-4T-1/EGFRECD,转化BL21(DE3)宿主菌;采用Sal I和Not I双酶切和序列分析鉴定插入序列的正确性:并用IPTe诱导工程菌,SDS—PAGE及Western blotting分析融合蛋白的表达。结果双酶切鉴定表明,EGFR胞外区序列已经正确克隆到GST融合表达载
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