【摘 要】
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通过整合差速离心和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)技术,建立了能有效分离20S蛋白酶体(20S core particle,CP)的方法。与传统纯化方法比较,此方法具有经济、快速的特
【机 构】
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中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.20675088);863计划(No.2006AA02Z154);高等学校博士学科点专项科研基金(No.20070023023)资助项目
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通过整合差速离心和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)技术,建立了能有效分离20S蛋白酶体(20S core particle,CP)的方法。与传统纯化方法比较,此方法具有经济、快速的特点,并且能够对不同组织细胞来源的CP进行分离。利用本方法对人红细胞来源的CP亚基进行了2-DE分离和MALDI-TOF/TOFMS鉴定。结果显示,可鉴定出33个具有不同相对分子量和等电点的蛋白点,此数量远远多于CP亚基的14种。此外,利用非变性/变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(native/SDS-PAGE)技术,比较了来源于酵母、小鼠肝脏、人红细胞、人胰腺癌细胞系SW1990和PANC-1的CP及其亚基在电泳行为方面的差异,进行了蛋白酶体异质性初探。
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