【摘 要】
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目的:建立人源性永生化肝细胞系,为生物人工肝和肝细胞移植等提供合适的细胞源.方法:利用SV40LTag基因和真核表达载体pcDNA3.1(-)经脂质体转染至来源于25岁男性脑死亡者供肝
【机 构】
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浙江大学医学院附属第一医院生物人工肝实验室
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目的:建立人源性永生化肝细胞系,为生物人工肝和肝细胞移植等提供合适的细胞源.方法:利用SV40LTag基因和真核表达载体pcDNA3.1(-)经脂质体转染至来源于25岁男性脑死亡者供肝的原代培养细胞,使其永生化,进一步鉴定其形态学特征和生物学功能.结果:经G418700～300μg/m1筛选,42天后获一抗G418永生化肝细胞系.该细胞系呈单层贴壁、上皮细胞样形态生长,体外培养可无限传代,具有分泌ALB、ALT、AST及LDH的功能,超微结构观察发现,转染肝细胞具有原代培养肝细胞的大多数典型特征,如较大的
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