【摘 要】
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目的 :建立一种适用于幽门螺杆菌 (Hp)大量扩增并提取致空泡变性细胞毒素 (Vac A)的液体培养方法。 方法 :采用TSB及 MHB培养液 ,加入小牛血清 (FBS)或环糊精 (CD)作为支持剂
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目 (3 0 170 42 7) .
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目的 :建立一种适用于幽门螺杆菌 (Hp)大量扩增并提取致空泡变性细胞毒素 (Vac A)的液体培养方法。 方法 :采用TSB及 MHB培养液 ,加入小牛血清 (FBS)或环糊精 (CD)作为支持剂 ,比较其对 Hp的扩增效果及上清中空泡毒素活性的差异。结果 :TSB+CD组 Hp平均扩增速度及菌体湿重与 TSB+FBS组相比无显著差异 ,二者均显著高于 MHB培养液组 (P<0 .0 1)。 TSB+CD组上清蛋白浓度为 (2 .4 4± 0 .39) m g/ m l,显著高于 MHB+CD组。 TSB培养液组浓缩上清具有明显的空泡毒性 ,且蛋白电泳可见相对分子质量为 95 0 0 0的 Vac A,而 MHB培养液组无空泡毒性。 结论 :以 TSB为培养液 ,加入适量的CD作为支持剂 ,在不损失 Vac A活性的前提下 ,可明显增加浓缩上清液中的蛋白纯度 ,是大量提取和制备 Hp Vac A蛋白理想的液体培养方法。
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