【摘 要】
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目的 探讨甲基莲心碱对结核分枝杆菌(MTB)诱导的THP-1细胞凋亡、炎性反应的的影响及对miR-3619-5p的调控作用.方法 体外培养人单核细胞THP-1、佛波酯(PMA)刺激细胞转化为巨噬细胞,MTB感染巨噬细胞,不同浓度的甲基莲心碱处理细胞,分别将miR-con、miR-3619-5p mimics转染至MTB感染的巨噬细胞,分别将miR-con、miR-3619-5p mimics转染至MTB感染的巨噬细胞后加入甲基莲心碱处理细胞;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检
【机 构】
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810001 青海省第四人民医院呼吸六科;810001 青海省第四人民医院呼吸四科;青海省西宁市第一人民医院重症医学科
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目的 探讨甲基莲心碱对结核分枝杆菌(MTB)诱导的THP-1细胞凋亡、炎性反应的的影响及对miR-3619-5p的调控作用.方法 体外培养人单核细胞THP-1、佛波酯(PMA)刺激细胞转化为巨噬细胞,MTB感染巨噬细胞,不同浓度的甲基莲心碱处理细胞,分别将miR-con、miR-3619-5p mimics转染至MTB感染的巨噬细胞,分别将miR-con、miR-3619-5p mimics转染至MTB感染的巨噬细胞后加入甲基莲心碱处理细胞;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、IL-10的水平;采用qRT-PCR法检测miR-3619-5p的表达水平;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量.结果 与NC组比较,MTB组凋亡率、Bax蛋白水平及TNF-α、IL-6、IL-10水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),甲基莲心碱可明显逆转上述作用(P<0.05);MTB感染的巨噬细胞中miR-3619-5p的表达水平降低(P<0.05),而甲基莲心碱可明显提高miR-3619-5p的表达水平(P<0.05);转染miR-3619-5p mimics可明显降低MTB感染的巨噬细胞凋亡率(P<0.05),降低Bax蛋白水平及TNF-α、IL-6、IL-10的水平(P<0.05),提高Bcl-2蛋白水平(P<0.05),而转染anti-miR-3619-5p可明显逆转上述作用(P<0.05);转染anti-miR-3619-5p可明显逆转甲基莲心碱对MTB感染的巨噬细胞凋亡及炎性反应的作用.结论 甲基莲心碱可通过上调miR-3619-5p的表达而抑制MTB诱导的THP-1源巨噬细胞凋亡及炎性反应,从而缓解结核感染.
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