【摘 要】
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多糖是灵芝发挥肿瘤预防治疗作用的主要有效成分之一,但其是否能在肿瘤免疫疗法中起到协同作用目前尚未明确.该研究通过对灵芝多糖促进T淋巴细胞肿瘤浸润的作用评价和机制研究,以期为其在肿瘤免疫疗法中的应用提供参考.采用水提醇沉法结合Sevag法制备灵芝多糖.分别以25、50、100 mg·kg-1剂量腹腔注射灵芝多糖,评价其对B16-F10荷瘤小鼠肿瘤生长的作用.采用免疫组化法检测肿瘤组织内CD3+、CD8+T细胞浸润情况和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达水平.以50、100、200 pg·mL-1的灵芝多
【机 构】
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四川省中医药科学院,四川成都610041;中药材品质及创新中药研究四川省重点实验室,四川成都610041;菌类药材系统研究与开发实验室,四川成都610041
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多糖是灵芝发挥肿瘤预防治疗作用的主要有效成分之一,但其是否能在肿瘤免疫疗法中起到协同作用目前尚未明确.该研究通过对灵芝多糖促进T淋巴细胞肿瘤浸润的作用评价和机制研究,以期为其在肿瘤免疫疗法中的应用提供参考.采用水提醇沉法结合Sevag法制备灵芝多糖.分别以25、50、100 mg·kg-1剂量腹腔注射灵芝多糖,评价其对B16-F10荷瘤小鼠肿瘤生长的作用.采用免疫组化法检测肿瘤组织内CD3+、CD8+T细胞浸润情况和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达水平.以50、100、200 pg·mL-1的灵芝多糖处理EA.hy926细胞,采用Western blot法测定ICAM-1表达水平.运用荧光标记的Jurkat细胞,测定灵芝多糖处理的EA.hy926细胞黏附能力.采用Western blot法检测核因子κB(NF-κB)p65、核因子κB抑制因子(IκBα)、p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白水平,分析基于NF-κB通路的作用机制.研究结果表明,灵芝多糖能够显著抑制B16-F10荷瘤小鼠肿瘤生长,增加CD3+、CD8+T细胞肿瘤浸润,促进肿瘤组织内ICAM-1表达;灵芝多糖可促进EA.hy926细胞生成ICAM-1,增加其对Jurkat细胞的黏附作用,诱导IκBα的磷酸化与蛋白降解,增强NF-κB p65的表达及其磷酸化水平.以上结果提示,灵芝多糖能够通过NF-κB通路促进ICAM-1表达,并进一步增强T淋巴细胞肿瘤浸润,从而发挥抑制肿瘤生长的作用.该研究结果可为灵芝多糖后续在肿瘤免疫疗法中的应用奠定相关基础.
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