【摘 要】
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目的构建携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）和人白细胞介素12双亚基目的基因（hIL-12，P35、P40）的真核表达质粒pEGFP—C1_IL-12，为进一步研究基因的定位、表达及hIL-12的抗肿瘤作用奠定
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院放射科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.30400108）
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目的构建携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）和人白细胞介素12双亚基目的基因（hIL-12，P35、P40）的真核表达质粒pEGFP—C1_IL-12，为进一步研究基因的定位、表达及hIL-12的抗肿瘤作用奠定基础。方法提取脂多糖（LPS）诱导后的人脐带血淋巴细胞总RNA，RT—PCR法扩增人白细胞介素12的双亚基P35和P40的全长cDNA，采用重叠PCR法连接两个亚基，双酶切双亚基片段及载体pEGFP—C1，T4DNA连接酶连接，重组质粒转化大肠埃希菌，挑取阳性克隆，PCR、双酶切及测序鉴定证实质粒构建
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