【摘 要】
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目的 研究采用RNA干扰技术抑制雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞中Survivin基因的表达对PC-3细胞增殖及凋亡的影响.方法设计2条靶向Survivin mRNA的Survivin shRNA,克隆至同一质粒载体,并鉴定分析;质粒转染PC-3细胞,绘制细胞生长曲线;并于转染48 h后进行Survivin基因蛋白表达及细胞凋亡检测.结果酶切鉴定、测序分析证实负载双片段Survivin shRN
【机 构】
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215004,苏州大学附属第二医院泌尿外科,215004,苏州大学附属第二医院泌尿外科,215004,苏州大学附属第二医院泌尿外科
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目的 研究采用RNA干扰技术抑制雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞中Survivin基因的表达对PC-3细胞增殖及凋亡的影响.方法设计2条靶向Survivin mRNA的Survivin shRNA,克隆至同一质粒载体,并鉴定分析;质粒转染PC-3细胞,绘制细胞生长曲线;并于转染48 h后进行Survivin基因蛋白表达及细胞凋亡检测.结果酶切鉴定、测序分析证实负载双片段Survivin shRNA的质粒载体构建成功.转染PC-3细胞后,细胞生长曲线示实验组PC-3细胞增殖明显受抑制;转染后48 h,实验组、阴性对照组、空白对照组Survivin蛋白表达强度分别为(4.62±0.84)%、(38.83±7.96)%和(40.98±3.83)%,实验组与两对照组相比差异均有显著性意义(P＜0.05);转染48 h后PC-3细胞凋亡率开始增加.结论负载双片段Survivin shRNA的质粒载体转染PC-3细胞后能明显抑制PC-3细胞增殖,抑制PC-3细胞Survivin蛋白表达,并能诱导PC-3细胞凋亡.但诱导PC-3细胞凋亡最明显的时机需要进一步观察。
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