【摘 要】
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目的 观察黄芪-丹参配伍对缺氧/复氧诱导的H9C2心肌细胞坏死性凋亡的影响，基于CaMKⅡδ-RIPK1/RIPK3-MLKL通路探讨其作用机制。方法 体外培养H9C2细胞，建立缺氧/复氧模型。将细胞分为对照组、模型组、黄芪丹参+激活剂（油酸）组、黄芪丹参组和抑制剂（KN-93磷酸盐）组，分别于相应培养基培养。试剂盒检测细胞上清液乳酸脱氢酶（LDH）水平，流式细胞术检测细胞凋亡，RT-qPCR和W
【基金项目】
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国家自然科学基金（81403386）； 全国名老中医药专家传承工作室建设项目（2022年）； 江苏省研究生科研与实践创新计划项目（SJCX22＿0837、SJCX22＿0858、SJCX22＿0859）； 江苏省中医药局科技项目（YB201922）；
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目的 观察黄芪-丹参配伍对缺氧/复氧诱导的H9C2心肌细胞坏死性凋亡的影响，基于CaMKⅡδ-RIPK1/RIPK3-MLKL通路探讨其作用机制。方法 体外培养H9C2细胞，建立缺氧/复氧模型。将细胞分为对照组、模型组、黄芪丹参+激活剂（油酸）组、黄芪丹参组和抑制剂（KN-93磷酸盐）组，分别于相应培养基培养。试剂盒检测细胞上清液乳酸脱氢酶（LDH）水平，流式细胞术检测细胞凋亡，RT-qPCR和Western blot检测钙调蛋白激酶（CaMK）Ⅱδ、受体相互作用蛋白激酶（RIPK）1、RIPK3、混合系激酶区域样蛋白（MLKL）mRNA和蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组细胞上清液LDH水平显著升高（P＜0.01），细胞凋亡率显著升高（P＜0.01）,CaMKⅡδ、RIPK1、RIPK3和MLKL mRNA和蛋白表达显著升高（P＜0.01）；与模型组比较，黄芪丹参组细胞上清液LDH水平显著降低（P＜0.01），细胞凋亡率显著降低（P＜0.01）,CaMKⅡδ、RIPK1、RIPK3和MLKL mRNA和蛋白表达显著降低（P＜0.05,P＜0.01）。黄芪丹参作用与CaMKⅡδ抑制剂KN-93磷酸盐相当。结论 黄芪-丹参配伍可减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤，抑制心肌细胞坏死性凋亡，其机制与下调CaMKⅡδ-RIPK1/RIPK3-MLKL通路有关。
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