【摘 要】
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目的：通过原核表达系统制备人黑色素瘤抗原A3（MAGE-A3）蛋白,制备其多克隆抗体,经鉴定后用于胃癌细胞检测.方法：将MAGE-A3全长核酸序列经原核密码子优化后全基因序列合成,克隆至原
【机 构】
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温州医科大学附属第一医院胃肠外科,温州医科大学分子病毒与免疫研究所微生物学与免疫学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（81372447）,浙江省自然科学基金资助项目（Y2100660）
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目的：通过原核表达系统制备人黑色素瘤抗原A3（MAGE-A3）蛋白,制备其多克隆抗体,经鉴定后用于胃癌细胞检测.方法：将MAGE-A3全长核酸序列经原核密码子优化后全基因序列合成,克隆至原核表达载体pET21a（＋）,构建pET21a（＋）/MAGE-A3重组质粒,转化至大肠杆菌BL21（DE3）,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达MAGE-A3蛋白,并经SDS-PAGE及Westernblot分析鉴定;纯化后的MAGE-A3蛋白免疫日本大耳白兔制备多克隆血清抗体,用ELISA、Weste
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