【摘 要】
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背景:如何改善损伤局部微环境,减少胶质瘢痕形成,促进神经元和轴突修复与再生,是治疗脊髓损伤的难点.研究发现,硫酸软骨素酶ABC可通过介导硫酸软骨素蛋白聚糖的降解,增强轴突的再生和可塑性;同时骨髓间充质干细胞来源外泌体可通过抗凋亡、调节免疫反应、增强神经元再生能力等途径在脊髓损伤修复中发挥作用.目的:研究骨髓间充质干细胞来源外泌体联合硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤的修复作用,并探讨其机制.方法:用外泌体提取试剂盒提取骨髓间充质干细胞外泌体,透射电镜观察外泌体形态,Western blot检测CD63、Al
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院骨科,辽宁省沈阳市 110000
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背景:如何改善损伤局部微环境,减少胶质瘢痕形成,促进神经元和轴突修复与再生,是治疗脊髓损伤的难点.研究发现,硫酸软骨素酶ABC可通过介导硫酸软骨素蛋白聚糖的降解,增强轴突的再生和可塑性;同时骨髓间充质干细胞来源外泌体可通过抗凋亡、调节免疫反应、增强神经元再生能力等途径在脊髓损伤修复中发挥作用.目的:研究骨髓间充质干细胞来源外泌体联合硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤的修复作用,并探讨其机制.方法:用外泌体提取试剂盒提取骨髓间充质干细胞外泌体,透射电镜观察外泌体形态,Western blot检测CD63、Alix表达.取50只SD大鼠随机分成5组:假手术组、模型组、硫酸软骨素酶ABC组、外泌体组、联合组,每组10只.采用改良Allen\'s法构建大鼠脊髓损伤模型,硫酸软骨素酶ABC组、联合组用微量注射器直接向损伤局部注射硫酸软骨素酶ABC,术后2 h,外泌体组、联合组通过尾静脉注射骨髓间充质干细胞来源外泌体,每隔2 d注射1次,共注射3次.脊髓损伤后第1,3,7,14,28天进行后肢运动功能评分,第14天每组取6只大鼠经灌注取材做成石蜡切片,苏木精-伊红染色观察脊髓损伤区病理变化,免疫荧光检测胶质纤维酸性蛋白表达,免疫组化检测生长相关蛋白43表达.结果 与结论:①外泌体呈圆形、椭圆形或“茶托样”,大小不均;CD63、Alix呈阳性表达;②与模型组、硫酸软骨素酶ABC组、外泌体组相比,联合组BBB评分高,脊髓损伤区面积小,胶质纤维酸性蛋白表达降低,生长相关蛋白43表达升高(P均<0.05);③结果 表明,骨髓间充质干细胞外泌体联合硫酸软骨素酶ABC能抑制损伤区胶质纤维酸性蛋白表达,上调生长相关蛋白43表达,减少胶质瘢痕形成,改善损伤局部微环境,从而促进大鼠脊髓损伤后神经元和轴突的修复与再生.
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