【摘 要】
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目的 分析大肠埃希菌中bla NDM基因的分子流行病学特征,及其遗传背景,为临床防控提供理论支持.方法 收集2015-2019年丽水市中心医院临床分离非重复碳青霉烯耐药大肠埃希菌,梅
【机 构】
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丽水市中心医院检验科,浙江丽水323000
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目的 分析大肠埃希菌中bla NDM基因的分子流行病学特征,及其遗传背景,为临床防控提供理论支持.方法 收集2015-2019年丽水市中心医院临床分离非重复碳青霉烯耐药大肠埃希菌,梅里埃Vitek 2 Compact系统鉴定菌株.微量肉汤稀释法联合KB纸片法确定药物敏感性,聚合酶链式反应(PCR)检测常见碳青霉烯类、超广谱-β内酰胺类和喹诺酮类耐药基因.多位点序列分型(MLST)明确各菌株ST型,并结合BacWGST数据库中92株产新德里金属-β-内酰胺酶(NDM)大肠埃希菌构建进化树分析.接合和转化实验纯化耐药质粒并确定质粒转移性,复制起始子分型(PBRT)鉴定质粒类型,特异性PCR检测bla NDM转座结构,最终从菌株,质粒,转座结构分析bla NDM基因流行特征.结果 共分离23株NDM型大肠埃希菌,对β-内酰胺类(除氨曲南),喹诺酮类,氨基糖苷类(除阿米卡星)抗菌药物高度耐药,仅对米诺环素、阿米卡星、磷霉素,多黏菌素B、替加环素敏感,PCR检出bla NDM-5、bla NDMI、bla CTX、bla TEM、bla SHV、qnrA、qnrS、qnrD、acc(6)-Ib-cr多种耐药基因.系统进化分析将14种ST型菌株,归为8类克隆群.PBRT检测到IncX3、IncF两种质粒,IncX3型占95.6％.转座结构分析显示bla NDM1基因均位于IncX3型质粒相同转座结构中,具有一定的地区特异性,而bla NDM5基因则在IncX3、IncF型质粒上均有,主要位于(ISAba125-IS5-bla NDM-5-bleMBL-trpF-dsbC-IS26)转座结构中,部分转座子缺失ISAba125序列.结论 bla NDM基因分离自14种ST型大肠埃希菌,位于IncX3、IncF质粒的3种转座结构中,主要通过In-cX3型质粒转移传播.
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