【摘 要】
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目的 观察热量限制对人二倍体成纤维细胞IMR-90衰老相关基因表达的影响.方法 应用RT-PCR和Western blot的方法,对含低浓度(3.0 mmol/L)、高浓度(22.5 mmol/L)葡萄糖和正常对
【机 构】
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卫生部北京医院北京老年医学研究所细胞室,北京大学医学部生物化学与分子生物学系
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目的 观察热量限制对人二倍体成纤维细胞IMR-90衰老相关基因表达的影响.方法 应用RT-PCR和Western blot的方法,对含低浓度(3.0 mmol/L)、高浓度(22.5 mmol/L)葡萄糖和正常对照组(含5.0 mmol/L葡萄糖)培养条件下的IMR-90细胞衰老相关基因p16、p21和p53的mRNA和蛋白表达水平进行分析.结果 与对照组和高糖培养条件下的早期和晚期细胞相比较,低浓度葡萄糖培养条件下的早期和晚期细胞p16和p21在mRNA水平均显著下降(P＜0.05);低浓度葡萄糖组、对照组和高浓度葡萄糖培养组晚期细胞p16蛋白水平分别为4.2、7.4、9.7,比各自早期细胞表达(0.6、1.0、1.8)增加5～7倍;低浓度葡萄糖组、对照组和高浓度葡萄糖培养早期细胞和低糖培养晚期细胞p21蛋白水平差异无统计学意义,分别为1.1、1.0、1.3、0.9,但与对照组和高糖培养晚期细胞p21蛋白水平(3.1、4.2)相比较则降低3～4倍;各组培养条件下的早期和晚期细胞中p53表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 各组晚期细胞比各自早期细胞p16基因表达增高;对照组和高糖培养条件下的晚期细胞比各自早期细胞p21基因表达增高;低浓度葡萄糖培养延缓IMR-90细胞衰老并伴有p16和p21基因表达下调;p53基因可能不是IMR-90细胞复制衰老主要调节因子.
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