碱性蛋白酶酶解家蚕蛹蛋白过程中的产物抑制效应研究

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测定碱性蛋白酶(alcalase)酶解家蚕蛹蛋白过程中不同水解度产物对酶解反应的抑制率,并通过Lineweaver-Burk双倒数曲线作图和紫外光谱分析,初步探讨酶解产物对碱性蛋白酶酶解反应的抑制机制.检测结果表明碱性蛋白酶酶解家蚕蛹蛋白的过程中存在产物抑制作用:当酶解产物水解度<9.2%时,其对酶解反应的抑制率随着水解度的增大而增大;酶解产物水解度>9.2%时,对酶解反应的抑制率则保持稳定.利用超滤膜和葡聚糖凝胶G-50从酶解产物中分离出具有强抑制作用的组分2,当其在酶解反应体系中的质量浓度达到2.0 mg/mL时,对酶解反应的抑制率为18.6%,且对碱性蛋白酶酶解反应呈现混合抑制模式.初步推测,当酶解产物组分2与碱性蛋白酶作用后,使酶蛋白分子发生折叠,其结构改变,从而导致对家蚕蛹蛋白的酶解效率下降.
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