【摘 要】
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目的建立和改良人肝脏星状细胞（human-hepatic stellate cells,hu-HSCs）分离方法,使之适于原代培养和研究。方法在传统分离HSCs方法的基础上,省略链霉蛋白酶和DNA酶,用EGTA液促
【机 构】
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复旦大学中山医院消化科-复旦大学上海医学院内科学系,西奈山医学院肝病科
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（3570825）致谢 本实验在标本来源方面获得中山医院肝外科大力支持,尤其感谢樊嘉、钦伦秀、周俭、吴志全等教授的帮助,中山医院实验研究中心胡美玉、周康老师、刘康达教授及内科实验室王逸青及方国汀老师给予指导和帮助,中山医院心血管病研究所邹云增教授给予指导以及贾建国老师协助拍摄实验图片.
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目的建立和改良人肝脏星状细胞（human-hepatic stellate cells,hu-HSCs）分离方法,使之适于原代培养和研究。方法在传统分离HSCs方法的基础上,省略链霉蛋白酶和DNA酶,用EGTA液促细胞解离,再用Ⅳ型胶原酶消化,差速离心去除肝实质细胞,最后用Nycodenz密度梯度离心纯化hu-HSCs,台盼蓝染色法计算细胞产量和进行活力评估,α-SMA、desmin免疫荧光染色及油红O脂滴染色鉴定细胞纯度。结果分离得到的原代hu-HSCs数量高达3×10^6个/克肝脏,纯度达9
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