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目的建立三叶青颗粒状愈伤组织悬浮培养系,并筛选出适合三叶青细胞生长和总黄酮积累的较佳培养条件。方法比较了基础培养基类型、碳源、氮源、激素等对三叶青颗粒状愈伤组织悬浮细胞生长及黄酮积累的影响。结果三叶青颗粒状愈伤组织悬浮培养可以采用两步法进行：先在MS培养基（含3%蔗糖、30 mmol/L总氮浓度、NH4＋-NO3-为1∶2、6-苄氨基嘌呤4 mg/L、吲哚丁酸1.5 mg/L）上培养24 d,再更换到B5培养基（含5%蔗糖、30 mmol/L总氮浓度、NH4＋-NO3-为0∶1、6-BA 2 mg/L、吲