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目的通过构建具有HA标签的DJ-1 L166P突变体（DJ-1 L166P-HA）,建立一种快速构建具有标签的突变体的方法——重叠法联合长引物法。方法 PCR分别扩增DJ-1的N端和C端。扩增C端的反向引物DJ-1-HA-R包含HA标签的编码序列,是具有60个核苷酸的长引物。然后,DJ-1的N端和C端重叠延伸获得DJ-1 L166P-HA全长。最后,克隆DJ-1 L166P-HA至质粒pcDNA3.1（＋）。结果 只需一次连接反应,成功地构建了具有HA标签的DJ-1 L166P突变体的重组质粒pcDNA3