巴西橡胶树HbCyt c1的克隆及表达分析

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橡胶树寒害和干旱逆境响应均与活性氧代谢和淬灭有关,研究表明细胞色素c1通过参与抗坏血酸的再生在抗旱、活性氧淬灭等逆境中发挥作用.为研究细胞色素c1基因在橡胶树寒害和干旱逆境响应中的作用机制,采用5'/3'末端快速扩增技术从巴西橡胶树‘热研7-33-97'叶片中克隆了一个细胞色素c1基因,通过生物信息学软件分析,可知其推导氨基酸含有特征性Cyt_c1家族结构域,将其命名为Hb Cytc1.HbCytc1全长1 351 bp,ORF933 bp.根据cDNA序列推导出该蛋白氨基酸,利用DNAman与其他植物中的同源Cytc1基因进行序列比对,发现橡胶树HbCytc1与蓖麻RcCytc1 (XP_ 002509561.1)、毛果杨PtCytc1 (XP_002313590.1)、克莱门柚CcCytc1 (XP_006441506.1)和烟草NsCytc1 (XP_009804309.1)氨基酸的相似性分别为91%、92%、89%和87%.系统进化分析显示,HbCytc1与RcCytc1、PtCytc1位于同一分支.表达分析结果显示,该基因在花、叶片和胶乳中表达,在树皮中不表达.在干旱、机械伤害和白粉菌侵染处理下,均显著上调该基因在橡胶树叶片中表达.结果表明Hb Cytc1受逆境反应诱导,参与橡胶树抗逆过程.为揭示细胞色素c1的功能和橡胶树抗逆响应的研究提供理论指导.
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