【摘 要】
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目的通过应用RNAi技术沉默肺癌细胞系A549中的PEG10基因,探讨PEG10在肺癌细胞系A549细胞增殖及侵袭迁移过程中的作用。方法 RPMI-1640培养肺癌A549细胞。瞬时转染及建立稳定
【机 构】
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郑州大学附属郑州中心医院呼吸及重症医学科,南昌大学第二附属医院胸外科
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目的通过应用RNAi技术沉默肺癌细胞系A549中的PEG10基因,探讨PEG10在肺癌细胞系A549细胞增殖及侵袭迁移过程中的作用。方法 RPMI-1640培养肺癌A549细胞。瞬时转染及建立稳定转染shRNA PEG10细胞系;MTT及软琼脂克隆形成实验检测PEG10基因沉默对A549肺癌细胞增殖的影响;细胞划痕试验和Transwell小室方法观察PEG10基因沉默对A549肺癌细胞迁移能力的影响;逆转录RT-PCR、实时定量qRT-PCR及Western blot检测PEG10、β-catenin和其下游分子cmyc、MMPs、twist、E-cadherin、Vimentin表达水平的变化。结果 PEG10干扰效率达65%;转染后肺癌细胞划痕愈合速度变慢;穿过Transwell小室的细胞数减少;克隆形成数目也降低,同时检测到β-catenin及c-myc、MMPs、twist、Vimentin表达水平降低,E-cadherin表达水平升高。结论靶向封闭PEG10基因可下调Wnt/β-catenin信号通路的关键因子β-catenin的表达水平,降低肺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移能力,部分逆转肺癌上皮间质转化。
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