探讨miR-892a对前列腺癌细胞的增殖和迁移能力的影响。
方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载499例前列腺肿瘤及52例癌旁组织的微小RNA(miRNA)的样本资料，再采用R语言的limma包及gplots包进行差异表达分析，绘制火山图和热图，筛选目的基因。采用荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测前列腺上皮细胞(RWPE-1)和前列腺癌细胞(DU145、PC3)中miR-892a表达情况。将miR-892a模拟物(miR-892a mimic组)及阴性对照(miR-NC组)分别转染前列腺癌PC3细胞，采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、低密度集落形成实验及Transwell小室细胞迁移实验检测两组细胞的增殖及迁移，通过生物信息学在线预测网站预测miR-892a的潜在靶基因为性别决定区Y框蛋白5(SOX5)，RT-PCR、Western blot实验及荧光素酶报告基因实验验证miR-892a靶向调控SOX5。
结果筛选的目的基因为miR-892a。前列腺癌细胞PC3和DU145中miR-892a的相对表达量分别为0.41±0.40和0.47±0.45，明显低于前列腺上皮细胞的1.18±0.35，差异有统计学意义(F＝340.330, P<0.01)，选择PC3细胞作为后续研究对象。MTT增殖实验结果显示，miR-892a mimic组在24 h、48 h、72 h和96 h光度值均低于miR-NC组，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。低密度细胞集落形成实验中，过表达miR-892a后，miR-892a minic组细胞克隆数为251.00±64.84，miR-NC组为433.28±62.93；Transwell小室细胞迁移实验中miR-892a mimic组穿过小室的细胞数为340.33±31.30，miR-NC组为534.33±61.07，差异均有统计学意义(t＝-3.194、-4.906，P值均<0.05)。miR-NC组和miR-892a mimic组的SOX5 mRNA相对表达水平分别为1.021±0.012和0.156±0.017，SOX5的蛋白表达水平分别为0.519±0.014和0.196±0.019，两组差异均有统计学意义(t＝71.807、24.097, P值均<0.01)。野生型miR-892a mimic组荧光素酶比值为0.37±0.08，miR-NC组为0.97±0.10，差异有统计学意义(t＝12.890, P<0.01)。SOX5的蛋白表达水平低于于NC组(t＝71.807, P<0.01)，并且miR-892a能够直接靶向SOX5发挥生物学效应(t＝12.890, P<0.01)。
结论与前列腺上皮细胞相比较，miR-892a在前列腺癌PC3细胞中显著低表达；过表达miR-892a能够抑制前列腺癌细胞的增殖和迁移，并靶向调控SOX5。