【摘 要】
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透明质酸是一种被广泛应用于医药、化妆品和食品等领域的糖胺聚糖.透明质酸的主要工业生产菌株为兽疫链球菌,由于该细菌具有致病性,因此迫切需要构建安全的透明质酸生产菌株.
【机 构】
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工业生物技术教育部重点实验室(江南大学),江苏 无锡,214122江南大学 生物工程学院,江苏 无锡,214122;江南大学 生物工程学院,江苏 无锡,214122;
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透明质酸是一种被广泛应用于医药、化妆品和食品等领域的糖胺聚糖.透明质酸的主要工业生产菌株为兽疫链球菌,由于该细菌具有致病性,因此迫切需要构建安全的透明质酸生产菌株.通过在食品级表达宿主谷氨酸棒杆菌中异源表达透明质酸合酶基因(pmHasA),实现了透明质酸的合成,摇瓶中产量达到0.35 g/L.通过强化代谢途径中尿苷二磷酸-葡萄糖脱氢酶基因(ugdA2)和磷酸氨基转移酶基因(glmS)的表达以及敲除乳酸脱氢酶基因(ldh),透明质酸产量提高至0.81 g/L.在此基础上优化诱导条件,确定异丙基-β-D硫代半乳糖苷浓度为0.8 mmol/L,诱导剂添加时间为2 h时,摇瓶中透明质酸产量最高达到1 g/L.经过3 L发酵罐分批补料发酵,透明质酸产量达到4.8 g/L.该文通过调控谷氨酸棒杆菌代谢途径实现了透明质酸安全、高效的合成,为食品级透明质酸的生产奠定了基础.
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