【摘 要】
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目的 建立基于FITC-抗FITC放大系统的检测人粪便中诺如病毒抗原的ELISA方法,用于筛查或辅助诊断诺如病毒感染.方法 以诺如病毒特异性单克隆抗体1包被微孔板,用异硫氰酸荧光素
【机 构】
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天津市河西区疾病预防控制中心;天津市儿童医院;北京新兴四寰生物技术有限公司
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目的 建立基于FITC-抗FITC放大系统的检测人粪便中诺如病毒抗原的ELISA方法,用于筛查或辅助诊断诺如病毒感染.方法 以诺如病毒特异性单克隆抗体1包被微孔板,用异硫氰酸荧光素(FITC)标记配对的诺如病毒特异性单克隆抗体2,以辣根酶标记的抗FITC抗体作为示踪物,建立检测人粪便中诺如病毒抗原的ELISA方法,使用商业化酶联免疫法试剂盒和分型试剂进行比对分析.结果 该方法的捕获抗体鼠抗诺如病毒单克隆抗体1的最佳包被量为1∶2 000,FITC标记的检测抗体鼠抗诺如病毒单克隆抗体2的最佳稀释度为1∶1 000,辣根酶标记的抗FITC抗体最佳稀释度为1∶1 200;临界值为0.368;板间和板内变异系数均小于5％;灵敏度和特异性均大于95％;对拜发酶联免疫法试剂盒与本方法进行了一致性(Kappa)检验,表明两种检测方法所得结果之间一致性良好(k=0.986).收集231份住院腹泻患儿粪便标本经该方法检测,46份呈诺如病毒阳性,阳性率为19.91％;经酶联免疫法试剂盒(德国拜发公司)检测,45份呈阳性.与分型试剂盒(欧佩沦公司)比较,阳性符合率为91.3％(42/46),阴性符合率为97.9％(185/189).结论 基于FITC-抗FITC放大系统的ELISA方法适用于人粪便中诺如病毒抗原的监测,特异性和灵敏度较好,有助于诊断由诺如病毒引起的急性腹泻.
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