【摘 要】
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为制备Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)双层结构病毒样颗粒,选择牛病毒性腹泻病毒(BVDV)流行株BVDV JZ05-1核心蛋白p14的第169~270位氨基酸和FMDV Asia 1/JS/CHA/05结构蛋白VP1的第
【机 构】
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新疆农业大学动物医学学院,新疆畜牧科学院兽医研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31060346);公益性行业(农业)科研专项(201103008)
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为制备Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)双层结构病毒样颗粒,选择牛病毒性腹泻病毒(BVDV)流行株BVDV JZ05-1核心蛋白p14的第169~270位氨基酸和FMDV Asia 1/JS/CHA/05结构蛋白VP1的第1~211位氨基酸,两者之间设计柔性肽连接,人工合成p14-柔性肽-VP1融合蛋白编码序列,全基因长990bp。合成基因与枯草芽胞杆菌表达载体p7257-P43连接,构建成表达质粒p7257-P43-P14-VP1。转化枯草芽胞杆菌WB800,经筛选、鉴定,获得表达p14-VP1融合蛋白的枯草芽胞杆菌。该重组表达菌在含有40μg/mL氯霉素的LB中培养后,菌体超声破碎可检测到目的蛋白。Western blot结果显示,该蛋白能特异性识别Asia 1型FMDV抗体,具有良好的反应原性。电镜观察显示,融合蛋白组装为直径约50nm大小的病毒样颗粒(VLP)。
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