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【摘要】目的：观察葛根素对D-半乳糖大鼠衰老-动脉硬化-高粘血症大鼠内皮素-1（ET-1）和一氧化氮(NO)水平的影响。方法：用D-半乳糖诱导衰老-动脉硬化-高粘血症病理模型，随机分为阳性阿斯匹林（Asp）组、葛根素注射液（Pue）高、中、低三个剂量组、模型对照组及空白对照组，分别给药4周后，测定大鼠血浆中的NO、ET-1含量及NOS、iNOS活性的变化。结果:模型组的血压明显升高，NO、NOS、iNOS明显降低，ET-1显著升高（P<0.05～0.01）；Asp和Pue 80mg和40mg•kg-1组，均能降低病大鼠ET-1含量和血压（P<0.05～0.01）；Asp和Pue 80mg•kg-1组能显著升高NO含量和NOS、iNOS活性（P<0.05～0.01）；Pue 20mg•kg-1组对上述各指标，则差异均未见显著性（P>0.05）。结论：Pue可有效调节动脉硬化-高粘血症大鼠ET-NO间的动态平衡,保护血管内皮细胞，从而改善内皮细胞功能。
【关键词】葛根素;D-半乳糖;动脉硬化;高粘血症;内皮素;一氧化氮
【中图分类号】R282.6【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)12-0008-02
动脉硬化和高粘血症（Blood Hypervisiosity，简称HBS）是临床上诱发心肌梗塞、脑血栓等疾病及加重高血压、糖尿病等心脑血管疾病的病情的重要因素。一氧化氮(nitric oxide,NO),内皮素-1 (endothelin,ET-1)是血管内皮细胞分泌的血管活性物质,它们在缺血、缺氧中所起的作用受到广泛关注。本研究通过观察葛根素对D-半乳糖大鼠衰老-动脉硬化-高粘血症大鼠ET-1和NO水平的影响，探讨葛根素(puerariae,Pue)对动脉硬化和HBS的防治作用，旨在尽快尽早地对HBS进行防治，减少严重的慢性非传染性疾病对人类健康的危害性。
1材料
1.1药物与试剂葛根素注射液（Pue，海南斯达制药有限公司，批号：071104029）；拜阿司匹林（Asp,德国拜耳药厂，批号：070210），应用时用50%丙二醇稀释至所需浓度；丙二醇（广州化学试剂厂，批号：950202-3）；NO、NOS、iNOS试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号：20071221和20070812）。
1.2 SD大鼠及饲料均购自广东省医学实验动物中心，体重150g-180g，鼠龄6-8wks，♀♂各半，质量合格证：检证字2007A024；本所动物实验室环境设施合格证：2007C020。D-半乳糖（上海试剂二厂生产，批号：20071006）。
1.3 仪器BECMAN全自动生化分析仪（美国BECMAN公司）；TGL-16G型高速冷冻离心机（上海医用分析仪器厂产品）；DG23022A酶联免疫分析仪（南京华东电子管厂产品）。
2方法与结果
2.1方法
2.1.1模型的制备及实验分组SD大鼠（6～8 wk，150～180g）120只，按体重随机分出20只大鼠作为①空白对照组，腹腔注射0.9%生理盐水。其余大鼠用作造模，每日腹腔注射5%D-半乳糖，150 mg•kg-1，qd×6wk。所有大鼠均自由进食及摄水，连续2周。对按体重随机分为以下5组：①模型对照组(D.W.，10ml•kg-1)；②阿司匹林片组（30mg•kg-1）；③葛根素高剂量组（300mg•kg-1）；④葛根素中剂量组（150mg•kg-1）；⑤葛根素低剂量组（75mg•kg-1）。
2.1.2血样采集及检测各组分别ig药物或DW，qd×4wk。其中空白对照组ig. D.W. 10ml•kg-1。实验完成时，全部大鼠均从眼眶取血，以3.8%枸椽酸钠1∶9抗凝，-20℃冰箱保存待用。分别用试剂盒，按说明检测血浆中NO、NOS、iNOS、ET-1的水平。
2.1.3统计学分析采用SPSS11.0统计软件进行数据处理，计量资料采用组间t检验（方差不齐，用t′检验），P<0.05作为数理统计差异的显著性。数据用±s表示。
2.2结果
2.2.1Pue对衰老-动物硬化-高粘血症大鼠血浆NO、ET-1含量，NOS及iNOS活性的影响由表1可见，模型大鼠血浆的NO、及NOS、iNOS活性显著降低，ET-1含量显著升高（P<0.01）。ASP、Pue 80mg和40mg•kg-1组，均能升高模型大鼠的NO含量和NOS、iNOS活性，降低ET-1含量（P<0.05-0.01）；Pue 20mg•kg-1组亦能升高iNOS的含量(P<0.01)，但对NOS的含量则差异未见显著性（P>0.05）。
2.2.2Pue对衰老-动物硬化-高粘血症大鼠（收缩压，Kpa）的影响由表2结果可见，模型大鼠给药前、给药后2wk及4wk的血压水平均明显的升高，与空白对照组比较有显著差异性（P<0.05）；Pue 80mg•kg-1组在给药2wk、4wk后均能有效的降低病鼠的血压（P<0.05-0.01）；Pue 40mg•kg-1组在给药2wk后，血压没有明显的改变（p﹥0.05），但给药4wk后能明显的降低病鼠的血压（P<0.01）,ASP、Pue20mg•kg-1组对病鼠血压的作用则未见显著性差异（p﹥0.05）。
3讨论
动脉硬化和HBS在中老年人群中发病率较高，患者多具有共同的临床特点—生理性衰老。HBS是指因一个或几个血液粘滞因子升高而造成血液粘度长期处于一个较高状态而导致的一种病理综合征[1]。临床上引起高粘血症的各种因素之间相互影响，并形成恶性循环，最终导致血流阻力增加，微循环流量减少，组织缺氧。尽管引起老年性疾病的病因是复杂的，多方面的，但是目前大量研究表明衰老造成的动脉硬化、HBS引起的血液流变学异常是其重要因素之一[2]。葛根素是中草药葛根的主要有效成分。具有抗自由基损伤、抑制血小板活化与聚集、扩张心血管、降低心肌耗氧、改善心肌代谢和心脏功能等众多药理作用,对内皮细胞也具有一定的保护作用。由于葛根素具有可以扩张血管、改善微循环障碍及血液流变学指标等的作用，因此目前临床上也有用于治疗动脉硬化及HBS，并取得一定的疗效，但尚缺乏相应的实验数据支持。从本实验结果可见，模型组大鼠血浆的NO、NOS 、iNOS含量较正常组明显下降，而血压及ET-1则明显升高，提示衰老-动脉硬化-高粘血症大鼠存在着血管壁的异常，血管内皮细胞损害的状态，NO-ET间动态失衡；而葛根素可升高病鼠血浆的NO的含量，提高NOS、iNOS活性,下调血浆ET-1水平,从而抑制某些细胞的异常生长增殖及ECM合成，有效地改善了高血压的状态。
参考文献
[1]李其信.中医药治疗高粘血症的临床研究近况[J].淅江中医杂志,2002,7
[2]任琼辉,杨帆,孙瑞生,等.500例干部体检血流变改变与心血管病和衰老的关系[J].中国微循环,1999,3
(收稿日期：2009.03.10)
【关键词】葛根素;D-半乳糖;动脉硬化;高粘血症;内皮素;一氧化氮
【中图分类号】R282.6【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)12-0008-02
动脉硬化和高粘血症（Blood Hypervisiosity，简称HBS）是临床上诱发心肌梗塞、脑血栓等疾病及加重高血压、糖尿病等心脑血管疾病的病情的重要因素。一氧化氮(nitric oxide,NO),内皮素-1 (endothelin,ET-1)是血管内皮细胞分泌的血管活性物质,它们在缺血、缺氧中所起的作用受到广泛关注。本研究通过观察葛根素对D-半乳糖大鼠衰老-动脉硬化-高粘血症大鼠ET-1和NO水平的影响，探讨葛根素(puerariae,Pue)对动脉硬化和HBS的防治作用，旨在尽快尽早地对HBS进行防治，减少严重的慢性非传染性疾病对人类健康的危害性。
1材料
1.1药物与试剂葛根素注射液（Pue，海南斯达制药有限公司，批号：071104029）；拜阿司匹林（Asp,德国拜耳药厂，批号：070210），应用时用50%丙二醇稀释至所需浓度；丙二醇（广州化学试剂厂，批号：950202-3）；NO、NOS、iNOS试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号：20071221和20070812）。
1.2 SD大鼠及饲料均购自广东省医学实验动物中心，体重150g-180g，鼠龄6-8wks，♀♂各半，质量合格证：检证字2007A024；本所动物实验室环境设施合格证：2007C020。D-半乳糖（上海试剂二厂生产，批号：20071006）。
1.3 仪器BECMAN全自动生化分析仪（美国BECMAN公司）；TGL-16G型高速冷冻离心机（上海医用分析仪器厂产品）；DG23022A酶联免疫分析仪（南京华东电子管厂产品）。
2方法与结果
2.1方法
2.1.1模型的制备及实验分组SD大鼠（6～8 wk，150～180g）120只，按体重随机分出20只大鼠作为①空白对照组，腹腔注射0.9%生理盐水。其余大鼠用作造模，每日腹腔注射5%D-半乳糖，150 mg•kg-1，qd×6wk。所有大鼠均自由进食及摄水，连续2周。对按体重随机分为以下5组：①模型对照组(D.W.，10ml•kg-1)；②阿司匹林片组（30mg•kg-1）；③葛根素高剂量组（300mg•kg-1）；④葛根素中剂量组（150mg•kg-1）；⑤葛根素低剂量组（75mg•kg-1）。
2.1.2血样采集及检测各组分别ig药物或DW，qd×4wk。其中空白对照组ig. D.W. 10ml•kg-1。实验完成时，全部大鼠均从眼眶取血，以3.8%枸椽酸钠1∶9抗凝，-20℃冰箱保存待用。分别用试剂盒，按说明检测血浆中NO、NOS、iNOS、ET-1的水平。
2.1.3统计学分析采用SPSS11.0统计软件进行数据处理，计量资料采用组间t检验（方差不齐，用t′检验），P<0.05作为数理统计差异的显著性。数据用±s表示。
2.2结果
2.2.1Pue对衰老-动物硬化-高粘血症大鼠血浆NO、ET-1含量，NOS及iNOS活性的影响由表1可见，模型大鼠血浆的NO、及NOS、iNOS活性显著降低，ET-1含量显著升高（P<0.01）。ASP、Pue 80mg和40mg•kg-1组，均能升高模型大鼠的NO含量和NOS、iNOS活性，降低ET-1含量（P<0.05-0.01）；Pue 20mg•kg-1组亦能升高iNOS的含量(P<0.01)，但对NOS的含量则差异未见显著性（P>0.05）。
2.2.2Pue对衰老-动物硬化-高粘血症大鼠（收缩压，Kpa）的影响由表2结果可见，模型大鼠给药前、给药后2wk及4wk的血压水平均明显的升高，与空白对照组比较有显著差异性（P<0.05）；Pue 80mg•kg-1组在给药2wk、4wk后均能有效的降低病鼠的血压（P<0.05-0.01）；Pue 40mg•kg-1组在给药2wk后，血压没有明显的改变（p﹥0.05），但给药4wk后能明显的降低病鼠的血压（P<0.01）,ASP、Pue20mg•kg-1组对病鼠血压的作用则未见显著性差异（p﹥0.05）。
3讨论
动脉硬化和HBS在中老年人群中发病率较高，患者多具有共同的临床特点—生理性衰老。HBS是指因一个或几个血液粘滞因子升高而造成血液粘度长期处于一个较高状态而导致的一种病理综合征[1]。临床上引起高粘血症的各种因素之间相互影响，并形成恶性循环，最终导致血流阻力增加，微循环流量减少，组织缺氧。尽管引起老年性疾病的病因是复杂的，多方面的，但是目前大量研究表明衰老造成的动脉硬化、HBS引起的血液流变学异常是其重要因素之一[2]。葛根素是中草药葛根的主要有效成分。具有抗自由基损伤、抑制血小板活化与聚集、扩张心血管、降低心肌耗氧、改善心肌代谢和心脏功能等众多药理作用,对内皮细胞也具有一定的保护作用。由于葛根素具有可以扩张血管、改善微循环障碍及血液流变学指标等的作用，因此目前临床上也有用于治疗动脉硬化及HBS，并取得一定的疗效，但尚缺乏相应的实验数据支持。从本实验结果可见，模型组大鼠血浆的NO、NOS 、iNOS含量较正常组明显下降，而血压及ET-1则明显升高，提示衰老-动脉硬化-高粘血症大鼠存在着血管壁的异常，血管内皮细胞损害的状态，NO-ET间动态失衡；而葛根素可升高病鼠血浆的NO的含量，提高NOS、iNOS活性,下调血浆ET-1水平,从而抑制某些细胞的异常生长增殖及ECM合成，有效地改善了高血压的状态。
参考文献
[1]李其信.中医药治疗高粘血症的临床研究近况[J].淅江中医杂志,2002,7
[2]任琼辉,杨帆,孙瑞生,等.500例干部体检血流变改变与心血管病和衰老的关系[J].中国微循环,1999,3
(收稿日期：2009.03.10)