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[期刊论文] 作者：陈红军,王怀中,白华,吴时友,
来源：第二届南京农业大学畜牧兽医学术年会 年份：2008
猪是禽流感病毒“禽-猪-人”传播链中重要的中间宿主，了解猪流感的疫情动态将为流感的预防提供重要依据。血清学和病毒学监测发现我国猪群存在大范围的H1和H3亚型猪流感感染，本......
[期刊论文] 作者：吴时友, 吴明杰, 宫云浩,,
来源：中国兽医杂志 年份：2004
文本在我国首次报道应用核酸探针检测牛染性鼻气管炎病毒（IBRV）。经培养、纯化IBRV,抽提IBRV全基因组DNA,用缺口翻译法标记上32P,在硝酸纤维膜上进行打点杂交。试验结果表明:采...
[期刊论文] 作者：张伟,吴时友,尹燕博,牛钟相,
来源：中国兽医学报 年份：2007
根据PCR技术扩增出犬腺病毒（CAV）ORF1（p-Ⅷ）基因、犬细小病毒（CPV）VP2基因、鸡血红蛋白的珠蛋白基因（GLOBc）各保守基因片段；采用RT—PCR扩增出犬冠状病毒（CCV）纤突蛋白（S）基因、犬瘟热病毒......
[会议论文] 作者：吴时友,张伟,尹燕博,牛钟相,
来源：中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 年份：2007
采用PCR技术扩增出犬腺病毒(CAV)ORF1(p-Ⅷ)基因、犬细小病毒(CPV)VP2基因、鸡血红蛋白的珠蛋白基因(GLOBc)各保守基因片段；采用RT-PCR扩增出犬冠状病毒(CCV)纤突蛋白(S)基因、犬瘟热病毒(CDV)融合蛋白(F)基因、犬副流感病毒(CPIV)核衣壳结构蛋白(NP)基因、狂犬......
[期刊论文] 作者：李军, 吴时友, 尹燕博, 牛钟相,,
来源：家畜生态学报 年份：2006
根据鸡新城疫F糖蛋白的保守基因序列,设计一对正引物。根据正引物设计一对与之相互补的负引物。正引物的5’端标记FAM,负引物的3’标记淬灭剂DABCYL。反应体系中进行引物杂交...
[期刊论文] 作者：陈凤梅, 吴时友, 尹燕博, 牛钟相,,
来源：畜牧兽医学报 年份：2005
随着养禽业集约化程度的不断提高,鸡呼吸系统疾病的发生呈逐年上升趋势.而且大多数的呼吸道疾病不是单一病原感染,而是多种病原混合感染,从临床上难以及时鉴别诊断,延误防治...
[期刊论文] 作者：陈凤梅,吴时友,尹燕博,牛钟相,
来源：家畜生态学报 年份：2006
用分子克隆方法获得新城疫病毒、禽流感病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒，鸡毒支原体各一段高度保守基因片段作为探针，用芯片点样仪点样到硝酸纤维膜上，制成检测基......
[期刊论文] 作者：张伟,吴时友,尹燕博,牛钟相,张秀美,
来源：中国预防兽医学报 年份：2008
根据已发表的狂犬病病毒（RV）的序列，设计合成能扩增高度保守核（N）蛋白片断的一对引物。通过生物素标记PCR技术，将核（N）蛋白基因片断作为探针点在硝酸素纤维膜上，制作成疾病诊断基因芯......
[会议论文] 作者：尹燕博;马永亚;田振宇;吴时友;,
来源：中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 年份：2007
本研究通过GeneBank设计猪流感特异荧光引物、TaqMan探针,以H1N1为例,对荧光RT-PCR的反应条件进行了一系列的优化,最终确定了反应条件。并成功克隆了猪流感基因特异基因片断,...
[会议论文] 作者：吴时友,陈红军,尹燕博,钱永华,
来源：中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 年份：2007
根据Genbank发表的核酸序列,运用DNAMAN软件,分析流感病毒的HA和NA基因序列间的差异性,分别设计合成流感病毒H1、H3、H9、N1和N2的特异分型引物,并根据A型流感病毒的型特异性基因(M基因),设计了A型流感病毒的通用引物.应用RT-PCR分别扩增各亚型的特异片断,并克......
[会议论文] 作者：尹燕博,陈红军,田振宇,吴时友,
来源：中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 年份：2007
猪是禽流感病毒"禽-猪-人"传播链中重要的中间宿主,了解猪流感的疫情动态将为动物流感及人流感的疾病预测及防制提供重要依据。1999～2001年间进行的血清学和病毒学监测发现我国猪群存在大范围的H1和H3亚型猪流感感染(李海燕等,2002),并从2001～2003年收集和送检的......
[期刊论文] 作者：李秀萍, 尹逊河, 吴时友, 尹燕博,
来源：动物医学进展 年份：2005
为了建立PCR直接检测奶牛乳房炎致病菌的方法,探索通用引物在奶牛乳房炎致病菌检测中的应用价值.利用16S rRNA基因的高度保守性,设计并合成细菌的通用引物,采用合成的引物扩...
[会议论文] 作者：尹燕博,陈桂来,田振宇,吴时友,
来源：中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 年份：2007
本文探索建立了间接ELISA检测猪流感抗体的方法,采用饱和硫酸铵和过层吸柱的方法得到粗制的抗原后,作为免疫原和ELISA包被抗原,并进行了ELISA条件优化,试验结果表明本方法可...
[会议论文] 作者：田振宇, 吴时友, 郑彤彤, 尹燕博, 牛钟相,,
来源： 年份：2004
通用探针是实时荧光PCR探针类的一种,具有高度的特异性和灵敏度,可对样品进行准确的定量分析。本试验主要对通用探针检测禽病毒病这一方法进行了研究,试验结果显示本方法的特...
[期刊论文] 作者：田振宇, 吴时友, 郑彤彤, 尹燕博, 牛钟相,,
来源：家畜生态学报 年份：2007
通用探针是实时荧光PCR探针类的一种，具有高度的特异性和灵敏度，可对样品进行准确的定量分析。本试验主要采用该方法对通用探针检测禽病毒病进行了研究，试验结果显示本方法的特......
[期刊论文] 作者：宫云浩,孙书华,吴时友,杨承渝,j.cowley,
来源：中国兽医科技 年份：1989
我们用澳大利亚Bresatic公司生产的光生物素与国内两家(称甲所和乙所)研制的光生物素进行标记核酸探针作了比较试验。 探针标记 在3个硅化玻璃管中,分别加入5μ1λDNA(0....
[会议论文] 作者：吴时友[1]张伟[2]尹燕博[1]牛钟相[3],
来源：中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 年份：2007
采用PCR技术扩增出犬腺病毒(CAV)ORF1(p-Ⅷ)基因、犬细小病毒(CPV)VP2基因、鸡血红蛋白的珠蛋白基因(GLOBc)各保守基因片段；采用RT-PCR扩增出犬冠状病毒(CCV)纤突蛋白(S)基因...
[期刊论文] 作者：田振宇,吴时友,郑彤彤,尹燕博,牛钟相,
来源：家畜生态学报 年份：2007
...
[期刊论文] 作者：李秀萍, 尹逊河, 高晨, 尹燕博, 吴时友,,
来源：山东畜牧兽医 年份：2008
基因芯片是近年来迅速发展的一门生物高新技术，它以其能够陕速、高效、大规模地同步检测的功能而得到发展。在奶牛乳房炎主要致病菌的检测中显示出重要的理论和实用价值。本文......
[期刊论文] 作者：高淑霞,吴时友,庄文忠,尹燕博,牛钟相,
来源：西北农业学报 年份：2006
应用PCR（或RT—PCR）分别扩增猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒-2型、日本乙型脑炎病毒和猪瘟病毒的一段保守序列，克隆到pMD18-T Simple Vec...
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