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[期刊论文] 作者:郑海学,刘湘涛,尚佑军,吴锦艳,冯霞,白兴文,田宏,孙世琪,, 来源:中国兽医科学 年份:2004
应用3′RACE法降落式扩增并克隆了猪水泡病病毒(SVDV)HK/70株基因组3′端的真实序列.测序结果表明,所扩增的目的基因片段长4 200 nt,包括非结构蛋白编码区(P2和P3)、3′端非...
[期刊论文] 作者:田宏,刘湘涛,林彤,吴锦艳,龚真莉,郑海学,代兴国,孙世琪,, 来源:中国兽医学报 年份:2004
从实验感染兔脾组织中提取总RNA,应用RT-PCR得到了CSFV C-株结构蛋白E2基因,定向克隆于逆转录病毒载体pBABE puro,经PCR、酶切和序列分析鉴定,获取阳性重组质粒.将该重组质粒...
[期刊论文] 作者:周岩岩,吴锦艳,李玲霞,刘丹,周建华,曹小安,刘永生,刘湘涛,尚佑军, 来源:病毒学报 年份:2021
小反刍兽疫(PPR)是羊、骆驼等小反刍动物的一种急性、烈性、接触性A类传染病,发病率和致死率极高。目前,PPR在全球仍呈现区域性流行和多地散发势态。为探讨PPRV及N蛋白体外诱导山羊外周血单个核细胞(PBMCs)在不同时间对PBMCs免疫应答效应的影响。本研究将PPRV N......
[期刊论文] 作者:董震,王志林,陈启伟,吴锦艳,尚佑军,刘永生,杨世华,兰喜, 来源:中国预防兽医学报 年份:2022
为探究鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium)VI型分泌系统(T6SS)分泌的效应蛋白Rhs对该菌生物学特性的影响,本研究利用Red同源重组技术构建了鼠伤寒沙门菌rhs1和rhs2基因缺失株CVCC541Δrhs1和CVCC541Δrhs2,同时构建了基因回补菌株C-Δrhs1和C-Δrhs2,并经PCR和测序......
[期刊论文] 作者:王光祥,郑海学,尚佑军,刘艳红,常艳燕,田宏,吴锦艳,陈江涛, 来源:中国兽医科学 年份:2009
为进一步研究猪圆环病毒2型(PCV2)的致病机制和基因功能,利用PCR方法从河北保定株(HBBD0608)猪PCV2病料中获得了PCV2全基因组序列,将其定向克隆入pEGFP-N1载体,成功构建了PCV2全...
[期刊论文] 作者:满自萍,田宏,吴锦艳,赵娜,尚佑军,杨春生,何生虎,刘湘涛, 来源:中国兽医科学 年份:2009
将2007年宁夏送检的疑似猪高热病病料处理后接种于Marc—145细胞,结果Marc-145细胞出现典型的细胞病变,应用猪生殖与呼吸综合征(PRRS)病原检测试剂盒从细胞培养物中检测到PRRSV,将......
[期刊论文] 作者:赵娜,田宏,吴锦艳,祁燕蓉,满自萍,尚佑军,何生虎,刘湘涛, 来源:中国兽医科学 年份:2009
根据GenBank中猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中国代表株CH-1a的基因组序列,设计包含完整ORF3、ORF5基因序列的2对特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV兰州分离株(Lanzhou株)的ORF3和...
[期刊论文] 作者:满自萍,田宏,吴锦艳,赵娜,尚佑军,刘湘涛,杨春生,何生虎, 来源:中国兽医科学 年份:2009
参考GenBank中登录的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Jiangxi株和CH—la株的ORF5基N序列,设计并合成了1对引物,对宁夏回族自治区送检的18份PRRS阳性分离毒株进行RT—PCR扩增,获得约...
[期刊论文] 作者:吴锦艳,田宏,蒙学莲,惠小婷,王耀杰,关玉华,尚佑军,刘永生, 来源:畜牧兽医学报 年份:2019
利用Gateway技术和慢病毒表达系统将山羊淋巴细胞信号活化因子SLAM稳定整合在Vero细胞基因组染色体上,建立稳定表达可增强小反刍兽疫病毒(PPRV)复制的SLAM的Vero阳性细胞亚克...
[期刊论文] 作者:赵娜,田宏,祁燕蓉,满自萍,吴锦艳,尚佑军,何生虎,刘湘涛, 来源:西北农业学报 年份:2009
根据猪繁殖与呼吸综合症病毒已知序列(ch-1a,AY032626)设计包含完整ORF3序列的1对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV甘肃Lanzhou株的ORF3基因,将其克隆到杆状病毒载体pFastBacHTA上,经...
[期刊论文] 作者:臧金凤,尚佑军,陈妍,吴锦艳,王光祥,张志东,刘湘涛,孙继国, 来源:河北农业大学学报 年份:2016
利用原核表达的布鲁氏菌BP26蛋白作为标准抗原蛋白,建立布鲁氏菌病抗体检测方法。本试验从布鲁氏菌S2疫苗株通过PCR扩增获得BP26基因,构建融合表达质粒pET-28a-BP26后并转化B...
[期刊论文] 作者:吴锦艳,田宏,尚佑军,刘湘涛,郑海学,靳野,尹双辉,满自萍,, 来源:畜牧兽医学报 年份:2009
将高致病性猪蓝耳病疑似病料接种Marc145细胞,发现该病料可使Marc145细胞产生CPE,应用猪蓝耳病病原检测试剂盒从细胞培养物中检测到PRRSV,命名为Gs/Lzh/07株。同时应用RT-PCR...
[期刊论文] 作者:郑海学,刘湘涛,尚佑军,张淼涛,冯霞,白兴文,吴锦艳,吕建亮, 来源:病毒学报 年份:2007
从实验感染猪水泡病病毒(SVDV)的乳鼠组织中提取RNA,利用长距离的RACE技术,扩增出覆盖SVDV HK′1/70株全基因组的2个忠实性的cDNA重叠片段(3′PCR片段和5′PCR片段),分别克隆进pGEM-T......
[期刊论文] 作者:吴锦艳,尚佑军,陈妍,王光祥,田宏,曹小安,尹双辉,樊天喜,, 来源:中国预防兽医学报 年份:2017
为了解国内羊肺炎支原体的流行情况,本研究应用正向间接血凝试验(IHA)对2014年-2015年间采自我国12个省44个市、县的3 402份未免疫血清样品进行了绵羊肺炎支原体(MO)、山羊支原体...
[期刊论文] 作者:臧金凤,吴锦艳,陈妍,王光祥,尹双辉,栾志舫,曹小安,尚佑军, 来源:畜牧与兽医 年份:2004
利用PCR技术从布鲁氏菌S2疫苗株中扩增获得外膜蛋白(OMP) 31基因,构建了原核表达质粒pGEX-6P-1-OMP31,并转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达,应用Western blot方法鉴定表达产物...
[期刊论文] 作者:郑海学,刘湘涛,尚佑军,张淼涛,冯霞,白兴文,吴锦艳,吕建亮, 来源:病毒学报 年份:2007
从实验感染猪水泡病病毒(SVDV)的乳鼠组织中提取RNA,利用长距离的RACE技术,扩增出覆盖SVDV HK1/70株全基因组的2个忠实性的cDNA重叠片段(3PCR片段和5PCR片段),分别克隆进pGEM...
[期刊论文] 作者:田宏,刘湘涛,吴锦艳,尚佑军,郑海学,代兴国,孙世琪,谢庆阁, 来源:细胞与分子免疫学杂志 年份:2008
目的:建立一种能稳定表达猪瘟E2蛋白的真核细胞系,并对E2蛋白的生物活性进行分析.方法:从实验感染兔脾组织中提取总RNA,应用RT-PCR得到了CSFV C-株结构蛋白基因E2,并在目的片...
[期刊论文] 作者:孙晶晶,曹小安,吴锦艳,尹双辉,周建华,兰喜,李学瑞,刘永生,尚佑军, 来源:中国兽医科学 年份:2020
为建立高效、快速和准确检测布鲁氏菌病原的免疫磁珠qPCR方法,本研究根据GenBank已经发表的布鲁氏菌流产株BRS 19 ku外膜蛋白(Omp19)基因组序列来设计qPCR方法所需要的引物和...
[期刊论文] 作者:刘丹,周广青,吴锦艳,曹小安,李玲霞,杜国玉,兰喜,刘永生,尚佑军, 来源:中国兽医科学 年份:2021
为了快速高效地检测小反刍兽疫病毒(PPRV),本研究旨在建立并优化小反刍兽疫N蛋白阻断化学发光抗体检测方法.原核表达并纯化了小反刍兽疫病毒N蛋白,用其免疫BALB/c小鼠,研制出...
[期刊论文] 作者:田宏,刘湘涛,张彦明,林彤,吴锦艳,谢庆阁,TIANHong,LIUXiang-tao,ZHANGYan-ming,LINTong,WUJin-yan,XIEQing-ge, 来源:动物医学进展 年份:2007
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