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[期刊论文] 作者:赵丽,崔保安,陈红英,宋凌云,方忠意,郑兰兰, 来源:华南农业大学学报 年份:2008
通过RT-PCR方法从用植物血凝素(PHA)活化60日龄海兰鸡的脾脏淋巴细胞中扩增出海兰鸡白细胞介素18(IL-18)成熟蛋白基因的cDNA,并将其克隆到pGEM-T Easy Vector载体上,DNA序列测定表...
[期刊论文] 作者:陈红英,方忠意,崔保安,李新生,夏平安,金钺, 来源:西北农林科技大学学报:自然科学版 年份:2009
【目的】克隆H9N2亚型禽流感病毒(AIV)河南株核蛋白(NP)基因,并将NP主要抗原表位区在大肠杆菌中进行表达,为禽流感基因工程诊断抗原的制备和开发奠定基础。【方法】根据GenBank公......
[期刊论文] 作者:刘素梅,方忠意,刘占通,邱天宝,巩丹, 来源:中兽医医药杂志 年份:2020
建立四环素含量的高效液相色谱测定法.样品用盐酸溶液溶解后上高效液相色谱仪测定,色谱条件为XBridge C18色谱柱(5 μm,4.6 mm×150 mm),流动相为甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾...
[期刊论文] 作者:彭丽, 吴宁鹏, 方忠意, 舒畅, 杜红鸽, 朱雷,, 来源:中国兽药杂志 年份:2018
建立了同时测定蜂蜜和蜂王浆中20种喹诺酮类药物的超高效液相色谱-串联质谱方法。以磷酸盐缓冲液(p H 3.0)溶液提取样品中的待测物,HLB固相萃取柱净化,液相色谱-串联质谱法测...
[期刊论文] 作者:陈红英, 李新生, 张红英, 方忠意, 王东方, 崔保安,, 来源:中国畜牧兽医 年份:2007
根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)TK基因序列,设计、合成1对引物,应用PCR技术对ILTV以色列疫苗株、河南分离株(ILTV-CG和ILTV-XY)进行PCR扩增,均能扩增出预期大小的目的片段,测...
[期刊论文] 作者:陈红英,崔保安,李新生,夏平安,王学斌,方忠意, 来源:农业生物技术学报 年份:2007
分别以鸡白细胞介素18成熟肽基因(mChIL-18)和鸡α-干扰素成熟肽基因(mChIFN-α)为模板,通过PCR及PCR重叠延伸技术(SOE)得到融合基因mChIL-18mChIFN-α。将融合基因克隆于pGEM-T Ea...
[期刊论文] 作者:方忠意, 舒畅, 李金磊, 李红婵, 高延玲, 吴志明,, 来源:中国奶牛 年份:2019
为了掌握市售纯牛奶和巴氏杀菌乳品质,指导消费者合理选择;从市场购买25个国内厂家和5个进口厂家140批次纯牛奶和巴氏杀菌乳,通过FOSS乳成分体细胞分析仪对其乳蛋白、乳脂肪...
[期刊论文] 作者:郑兰兰, 崔保安, 陈红英, 贾云飞, 陈瑞亮, 方忠意,, 来源:中国生物工程杂志 年份:2007
采集6月龄河南良杂猪脾脏,分离淋巴细胞后直接提取总RNA,进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,扩增产物进行T-A克隆、测序,获得了河南良杂猪IL-18全基因序列。序列测定表明,plL-18全......
[期刊论文] 作者:邱天宝, 刘素梅, 方忠意, 班付国, 韩立, 王丽,, 来源:中兽医医药杂志 年份:2014
建立HPLC法测定麻杏石甘散中苦杏仁苷含量的方法。色谱柱为Waters XBrigeTM C18(4.6 mm×150 mm,5μm);以水-甲醇-乙腈(90.0∶1.0∶9.0)为流动相;流速:1.0 mL/min;柱温:40℃;...
[期刊论文] 作者:邱天宝,刘素梅,方忠意,班付国,韩立,王丽, 来源:中兽医医药杂志 年份:2013
建立HPLC法测定麻杏石甘散中甘草酸含量的方法。色谱柱为Waters XBrigeTMC18(4.6 mm×150 mm,5μm);以甲醇-0.2 mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(45∶55∶1)为流动相;流速:1.0 mL/min;...
[期刊论文] 作者:郑兰兰,崔保安,陈红英,贾云飞,陈瑞亮,方忠意, 来源:华南农业大学学报 年份:2008
RT-PCR方法直接从猪脾脏淋巴细胞中扩增出猪白细胞介素18成熟蛋白基因的cDNA,克隆到pGEM-T载体,构建重组质粒pGEM-TpiL18,转化E.coli JM109感受态细胞,取PCR和酶切鉴定为阳性的重...
[期刊论文] 作者:方忠意,刘素梅,班付国,张发旺,宋志超, 来源:饲料研究 年份:2009
建立了超高效液相色谱-串联四级杆质谱法测定饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量。用乙腈提取,提取液经蒸干浓缩后用中性氧化铝和阳离子交换固相萃取柱净化,使用UPLC-MS/M进行......
[期刊论文] 作者:赵丽,崔保安,方忠意,李小康,陈红英,夏平安,朱瑞芳, 来源:中国预防兽医学报 年份:2007
根据编码猪伪狂犬病病毒gH基因保守序列,设计合成一对引物,通过改进病毒核酸提取方法和优化PCR反应条件,成功的从猪伪狂犬病毒感染的细胞中扩增出预期的355bp片段。而猪繁殖与呼......
[期刊论文] 作者:方忠意,刘素梅,刘占通,邱天宝,韩立,王军红, 来源:河南畜牧兽医:综合版 年份:2021
为测定穿梅三黄散中黄芩苷的含量水平,补充完善穿梅三黄散的质量标准,研究建立了穿梅三黄散中黄芩苷含量测定的高效液相色谱法。通过对方法准确度、精密度、耐用性、专属性试验的考察,试验结果表明该方法符合兽药质量标准分析方法验证指导原则的要求,具有快速简......
[期刊论文] 作者:李金磊, 舒畅, 方忠意, 董鹏, 狄元冉, 李红婵, 杨希, 来源:上海畜牧兽医通讯 年份:2004
ue*M#’#dkB4##8#”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:(100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技...
[期刊论文] 作者:孟伟, 李金磊, 狄元冉, 董鹏, 方忠意, 高延玲,, 来源:畜牧与饲料科学 年份:2017
为了掌握河南省奶牛养殖场金黄色葡萄球菌耐药情况,从规模化奶牛场采集500批样品,采用BD PhoenixTM100全自动微生物鉴定系统对分离的疑似金黄色葡萄球菌进行鉴定,并通过微量...
[期刊论文] 作者:董鹏,韩楠,李金磊,狄元冉,方忠意,高延玲, 来源:河南畜牧兽医:综合版 年份:2017
饲料及饲料原料是食品安全链的第一个也是最重要的一个环节,但饲料及饲料原料中致病微生物污染一直未得到重视。随着我国经济的快速发展,农村经济结构的调整,养殖业已日益成为农......
[期刊论文] 作者:郑兰兰,崔保安,陈红英,陈瑞亮,方忠意,李小康,赵丽, 来源:中国兽医学报 年份:2009
通过RT—PCR方法自猪脾脏淋巴细胞中扩增mpIL-18基因,序列测定表明,pIL-18全基因核苷酸长度为579bp,编码192个氨基酸。将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构建重组质粒pcDNA—IL18...
[期刊论文] 作者:宋凌云,崔保安,陈红英,方忠意,赵丽,管倩,吕晓丽, 来源:河南农业大学学报 年份:2007
参照GenBank上登陆的鸡α干扰素基因序列设计一对引物,应用PCR技术直接从固始鸡肝组织基因组DNA中扩增鸡α干扰素基因.将特异性片段克隆入pGEM-T Easy载体中,转化JM109感受态...
[期刊论文] 作者:刘素梅,方忠意,韩立,班付国,张跃京,臧合英,, 来源:中国兽药杂志 年份:2013
为了完善三子散的质量控制方法,采用薄层色谱法鉴别川楝子以及高效液相色谱法测定栀子苷的含量。色谱条件:XBridgeC18(5μm,4.6mm×150mm)色谱柱,流动相为乙腈一水(88:12),检测波长2......
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