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[会议论文] 作者：李男礼;贾立军;张守发;,
来源：中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会 年份：2013
为了解牛源犬新孢子虫NcGRA7基因的生物学特性.本试验应用PCR技术扩增牛源犬新孢子虫NcG-RA7基因,将PCR产物连接到pMD-18T Simple Vector载体,构建pMD 18-NcGRA7克隆质粒,经P...
[会议论文] 作者：刘明明,贾立军,李积旭,张守发,
来源：中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会 年份：2013
为了解猪附红细胞体的感染机制,本试验利用酵母双杂交方法,筛选与猪附红细胞体α-烯醇化酶相互作用的宿主蛋白.采用定点突变引物和Overlap-PCR方法扩增猪附红细胞体α-Eno基因的全长序列,扩增产物经双酶切后插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒转化至酵......
[会议论文] 作者：李积旭,刘明明,贾立军,张守发,
来源：中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会 年份：2013
为筛选猪附红细胞体α-烯醇化酶与宿主互作的靶蛋白,本试验构建了可以用于酵母双杂交技术筛选的α-烯醇化酶的诱饵载体pGBKT7-Eno.采用Overlap-PCR技术从感染猪附红细胞体血液DNA中扩增了Eno基因全长序列,定向克隆到酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组诱饵载体......
[会议论文] 作者：贾立军,刘明明,李积旭,于龙政,张守发,
来源：中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会 年份：2013
为构建应用于酵母双杂交系统的牛肝脏组织cDNA文库,试验提取牛肝脏组织的总RNA,运用SMA-RT和LD-PCR技术合成cDNA,并与文库线性载体pGADT7-Rec共转化酵母菌Y187中,构建酵母双杂交c-DNA文库.文库滴度高达5×108cfu/mL,插入片段集中在1-2 kb之间,具有较好的多态性,......
[会议论文] 作者：贾立军,刘明明,郭焕平,李男礼,张守发,
来源：中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会 年份：2013
无菌分离疑似犬新孢子虫感染而流产的胎牛脑组织,提取脑组织基因组DNA,应用犬新孢子虫Nc:5基因特异性引物进行PCR鉴定.同时将胎牛脑组织制成匀浆,加入双抗后接种于于Vero细胞进行连续培养,间隔2d更换培养液,并观察细胞状态.结果,流产胎牛脑组织经PCR检测,扩增出......
[会议论文] 作者：郭焕平;贾立军;薛书江;钱年超;张守发;,
来源：中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会 年份：2013
为构建犬新孢子虫AMA1基因的真核表达重组质粒,了解其在体外的表达情况.本试验采用RT-P-CR方法扩增牛源犬新孢子虫吉林株AMA1全长基因,构建了真核表达重组质粒PVAX1-NcAMA1；利...
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