论文部分内容阅读
目的:探讨黄芪甲苷(AstragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对TL1A高表达慢性实验性结肠炎小鼠IL-9表达的影响.方法:通过硫酸葡聚糖(dextran sulfate sodium,DSS)建立慢性实验性结肠炎模型.采用野生型C57BL/6小鼠和淋巴细胞高表达TL1A的转基因小鼠分组如下:Control组、DSS组、AS-Ⅳ低剂量组(20mg/kg·d)、AS-Ⅳ高剂量组(300mg/kg·d),每组10只.正常对照组引用蒸馏水,DSS组、AS-Ⅳ低剂量组和AS-Ⅳ高剂量组间断饮用2% DSS,共四周.AS-Ⅳ低剂量组和AS-Ⅳ高剂量组第14天开始给予黄芪甲苷灌胃治疗.每天评估小鼠的疾病活动指数(Disease activity index,DAI).H&E染色观察结肠组织病理改变,Western blot技术和real-time Q-PCR技术分别检测结肠组织中TL1A、DR3和IL-9蛋白及mRNA的表达水平.流式细胞术(Flow cytometry,FC)检测Th9细胞占CD4+T细胞比例,酶联吸附反应试验(enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)检测细胞上清液及血清中的IL-9的水平.结果:①与Control组相比,WT和Tg小鼠的DSS组小鼠体重明显减轻,DAI评分明显升高,结肠组织病理评分明显升高,髓过氧化物酶活性明显升高(P<0.05).与WT小鼠DSS组相比,Tg小鼠DSS组结肠炎症显著增加(P<0.05).②与control组相比,WT和Tg小鼠的DSS组小鼠结肠组织中TL1A和IL-9蛋白及mRNA水平明显升高,并且Tg小鼠较WT小鼠升高显著(P<0.05).给予AS-Ⅳ治疗后,WT和Tg小鼠的表达水平均明显降低(P<0.05).③与control 组相比,WT和Tg小鼠的DSS组小鼠肠系膜淋巴结(mesenteric lymph nodes,MLN)、脾脏中单个核淋巴细胞中Th9细胞的比例明显增加,并且Tg小鼠较WT小鼠增加显著(P<0.05).给予AS-Ⅳ治疗后,WT和Tg小鼠的Th9细胞比例明显下降(P<0.05).与AS-Ⅳ低剂量组相比,AS-Ⅳ高剂量组的Th9细胞比例下降更明显(P<0.05).与Tg小鼠相比,WT小鼠Th9细胞比例下降更明显(P<0.05).④ELISA检测肠黏膜固有层单个核细胞(Lamina propria mononuclear cells,LPMC)、MLN和脾脏中的单个核细胞上清液以及血清中的IL-9水平,结果与流式细胞术结果变化趋势一致.结论:TL1A高表达加重慢性实验性结肠炎的发生发展,同时能够促进Th9细胞分化和IL-9的表达.AS-Ⅳ通过下调TL1A、IL-9表达可改善慢性实验性结肠炎的炎症反应,并呈剂量依赖性.