目的研究不同年龄人真皮多能干细胞的分离、鉴定及体外分化特点。方法选取胎儿、小儿、中青年人、老年人正常皮肤标本(大小为1cm×1cm),采用干细胞培养基筛选原代克隆并记录克隆的数量和大小:检测各种标本来源的克隆细胞的体外分化情况并定量;进行单个细胞克隆分析并检测其相关蛋白的表达。结果胎儿、小儿、中青年人、老年人正常皮肤原代培养获得的悬浮克隆数分别为(20.1±2.5)×10~2、(15.8±5.7)×10~2、(10.8±1.3)×10~2、(6.3±1.4)×10~2 个,两两比较差异有统计学意义(P<0.01):原代克隆直径分别为(83.33±12.11)、(55.45±10.11)、 (45.71±11.70)、(42.14±8.09)μm,胎儿>小儿>中青年人、老年人(P<0.05)。定量分析观察到各种克隆细胞均能向神经元细胞、神经胶质细胞、平滑肌细胞和脂肪细胞分化;胎儿克隆细胞向神经元细胞优势分化,小儿组向神经胶质细胞优势分化,中青年人、老年人组向脂肪细胞优势分化。培养1个月,胎儿、小儿、中青年人、老年人克隆形成率依次为41.1%、25.5%、17.7%、15.2%;单个克隆增殖细胞亦能多向分化。克隆表达巢蛋白、纤维连接蛋白、原癌基因、信号转导和转录激活因子3、端粒体逆转录酶等蛋白。结论采用干细胞培养基能够有效分离不同年龄人真皮中具有克隆增殖和多向分化的干细胞。年龄对人真皮多能干细胞的数量、增殖和分化有影响。