【摘 要】
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目的 研究eIF6对核糖体形成的调控机制。方法 首先通过构建eIF6慢病毒低表达载体和对照载体,eIF6高表达载体和对照载体,转染293T细胞,并用puromycin筛选慢病毒稳定表达的
【机 构】
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第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,疾病蛋白质组学重庆市市级重点实验室,重庆400038
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目的 研究eIF6对核糖体形成的调控机制。方法 首先通过构建eIF6慢病毒低表达载体和对照载体,eIF6高表达载体和对照载体,转染293T细胞,并用puromycin筛选慢病毒稳定表达的细胞株,利用多聚核糖体分析(polysomal profile)技术检测核糖体40s亚基、60s亚基和80s亚基以及多聚核糖体的表达变化。结果 eIF6敲降后核糖体60s亚基形成减少,80s亚基和多聚核糖体形成增多,40s亚基无明显变化。相反,eIF6高表达后核糖体60s亚基形成增加,80s亚基和多聚核糖体形成减少。结论 通过本项研究证明了eIF6具有促进60s亚基形成和抑制80s亚基和多聚核糖体形成的作用,为进一步探讨eIF6在蛋白翻译水平调控的分子机制提供了新的切入点。
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