【摘 要】
：
目的：研究提取变异链球菌细胞内代谢组的最优方法.方法：离心收集对数期的变异链球菌沉淀,PBS清洗去除培养基和细胞外代谢产物后,分别以75％乙醇为提取介质于95℃水浴(热乙醇法)、50％乙腈为介质结合超声细胞破碎仪(超声法)、乙腈加玻璃珠并结合组织裂解仪(玻璃珠法)提取变异链球菌细胞内代谢组,应用高效液相色谱联合质谱仪(HPLC-MS)测定提取物中的小分子,比较三种方法的代谢组提取效果.结果：LC-
【机 构】
：
四川大学口腔疾病研究国家重点实验室 四川大学口腔疾病研究国家重点实验室;四川大学华西口腔医学院牙体
论文部分内容阅读
目的：研究提取变异链球菌细胞内代谢组的最优方法.方法：离心收集对数期的变异链球菌沉淀,PBS清洗去除培养基和细胞外代谢产物后,分别以75％乙醇为提取介质于95℃水浴(热乙醇法)、50％乙腈为介质结合超声细胞破碎仪(超声法)、乙腈加玻璃珠并结合组织裂解仪(玻璃珠法)提取变异链球菌细胞内代谢组,应用高效液相色谱联合质谱仪(HPLC-MS)测定提取物中的小分子,比较三种方法的代谢组提取效果.结果：LC-MS能够有效地检测出细菌胞内代谢产物.LC-MS结果显示采用玻璃珠法提取的代谢产物数量高于其他组(P＜0.05),热乙醇法提取的代谢产物数量显著高于超声法(P＜0.05).结论：以50％乙腈介质配合玻璃珠和组织裂解仪提取变异链球菌细胞内代谢产物效果优于热乙醇法和超声法,这可能是由于热乙醇法使部分热不稳定性的细菌内代谢产物挥发,超声破碎革兰氏阳性菌效果不佳.
其他文献
目的：评价AgNPs凝胶处理的牙本质抵抗Efaecalis的附着和生物膜形成的能力.方法：将200个牙本质片平均分为5组：生理盐水组、Ca(OH)2糊剂组、2％洗必泰(Chlorhexidine,CHX)凝胶组、0.01％和0.02％ AgNPs凝胶组.标本经上述药物处理7天后接种E.faecalis悬液,37℃厌氧培养1天或7天.SEM定性评价E.faecalis对牙本质的附着和生物膜形成情况,
龋病、牙髓根尖周疾病是临床的常见病、多发病,约占门诊患者的60％,与其他临床医学相比较,在治疗过程中其医疗风险相对较少,但在实际治疗过程中还是存在诸多医疗风险,如果沟通不畅或者考虑不全面同样会产生许多问题,带来严重的后果,如根管治疗中的器械折断、髓底或根管侧穿、麻醉意外、诊断不准确等等.本讲座就围绕此方面的问题结合临床经验和体会,从临床诊断、治疗过程中的风险预防和考虑以及医患如何进行沟通等方面进行
目的：探讨致龋相关变形链球菌(mutans Streptococci,MS)与重型婴幼儿龋(Severe Early Childhood Caries,SECC)相关性.方法：参照美国儿童牙科医学会(AAPD)诊断标准,病例组32例重度婴幼儿龋患儿(S-ECC组)及对照组32例无龋儿童(CF组),收集口腔菌斑样本行细菌培养,根据形态学特征分离并分子生物学方法进一步鉴定变异链球菌(Streptoco
生物膜内的细菌之间通过复杂的信号传递系统进行着信息交流.细菌的密度感应现象(quorum sensing)是这一信号系统的重要组成部分,细菌通过释放,发现,接受信号分子向其他个体表明它的存在而实现这一信息交流途径.细菌的密度感应现象使真核生物与原核生物之间的界限变得模糊,使细菌这一单细胞生物可以像多细胞生物一样拥有许多作为个体细胞生命所不可能拥有的特性,细菌的许多行为都受到密度感应机制的调控.随着
目的：探讨不同MMPs抑制剂对牙本质树脂粘接混合层强度及耐久性的影响.方法：在全酸蚀水湿粘接技术的基础上,使用Adper Single Bond2体系,应用氯己定(CHX)和米诺环素(MI)作为MMPs抑制剂预处理牙本质粘接界面,结合10％NaOC1溶液模拟体外界面老化实验,通过微拉伸力学强度测试和场发射扫描电镜观察断面类型及微观形态评估粘接强度及耐久性.结果：在未老化、老化5min、老化10mi
目的：羟基改性的聚酰胺胺树枝状大分子(PAMAM-OH)是一种成熟的广泛应用于生物医药领域的商品,拥有良好的生物相容性和较便宜的价格.本实验研究PAMAM-OH与脱矿牙本质的结合强度,以及其诱导脱矿牙本质再矿化的能力,并检测再矿化新生晶体堵塞牙本质小管的效果.方法：收集无龋第三磨牙20颗,制备3×3×1mm大小的牙本质标本.牙本质标本用0.5M的EDTA溶液脱矿30分钟后,首先检测2,4代PAMA
目的：研究燃煤型氟斑牙仔鼠下切牙牙胚组织中L型钙离子通道α1C亚型(L type calcium channelα1C subunit,CACNA1C)和质膜钙离子ATP酶1亚型(plasma membrane Ca2+-ATPase 1 subunit,PMCA1)表达水平的变化,探讨其与燃煤型氟斑牙发病机制的关系和意义.方法：通过模拟燃煤型氟中毒流行病区的高氟空气环境和高氟饮食结构,建立高仿真
目的：通过对医院内污水中变异链球菌特异噬菌体特性观察,为了解变异链球菌特异噬菌体吸附特异性及溶菌机理的分子生物学机制奠定物质基础.方法：利用变异链球菌标准株(Streptococcus mutans UA159)从污水中分离特异性噬菌斑,纯化增殖后得到其相应噬菌体m159.将该噬菌体m159与变异链球菌野生株的混合培养,筛选出对变异链球菌具有宽噬性的特异性噬菌体.结果：从污水中分离出变异链球菌特异
目的：基于变异链球菌葡萄糖基转移酶(GTFs)的晶体结构设计和筛选可特异性抑制其酶活性，从而抑制变异链球菌胞外多糖合成及生物膜形成的生物小分子，并通过体外实验和动物实验初步评估其防龋效能.方法：根据S.mutans UA159 GTFs的晶体结构进行计算机模拟筛选，构建包含51种候选小分子的GTFs相关性小分子库.采用蒽酮法筛选出库中可抑制变异链球菌胞外多糖合成的目标小分子.对小分子处理后的生物膜
目的：1.比较rnc突变株与vicK/X/KX突变株的一系列生物学特性,分析它们对多糖代谢相关基因表达水平的影响；2.分析rnc基因与vicRKX信号转导通路间是否存在相互作用及其模式；3.对rnc基因调节vicRKX信号转导系统的模式进行初步验证.方法：1.构建变异链球菌vicK/X/KX基因的失活突变株,rnc基因过表达株,及Smurnc补偿株；2.比较变异链球菌UA159,Smurnc,Sm