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目的:
研究LGP突变是否会引起新城疫病毒NDV M蛋白错误折叠,从而影响M蛋白与细胞膜的结合,进而影响病毒的装配和出芽进程,最终影响病毒的生物学特性。
方法:
本研究运用反向遗传学技术,以NDV ZJ1株为母本病毒,利用分子生物学手段突变M蛋白的LGP序列。通过反向遗传学技术拯救突变病毒rZJIGFP-M.GP/AA和rZJIGFP-M.LGP/GGL。并对重组病毒的生物学特性,在DFI细胞上的复制与出芽能力进行测定。
结果与结论:
发现当LGP突变为GGL的时候,重组病毒的生物学特性及出芽能力与母本病毒ZJI株相比并无明显差异;而当LGP突变为LAA的时候,重组病毒的生物学特性较母本病毒ZJI株有较大幅度致弱。出芽效率实验结果显示,其出芽效率也受到了严重的影响。由此推论,LGP可能发挥着与其他副粘病毒GG相似的作用,都能够影响M蛋白与宿主细胞膜的作用。当LGP序列突变为LAA的时候能够减少病毒的出芽或释放能力从而影响病毒的毒力。因此,研究表明M蛋白LGP序列可能通过影响M蛋白与宿主细胞膜的相互作用进而影响病毒的出芽及毒力。然而,其具体机制仍需进一步通过蛋白质结构模拟分析等手段来证实。