论文部分内容阅读
目的:观察全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠全骨髓细胞和骨髓基质干细胞PPARγ和P-GSK-3β蛋白表达的影响.方法:3月龄健康雌性未孕SD大鼠36只,体重260±12g,自由饮水及进食,标准啮齿类动物饲料适应性喂养1周后,按体重随机分为假手术、去卵巢静止和去卵巢振动3个组.手术前,各组大鼠均禁食12 ~18h,腹腔注射10%水合氯醛(3ml/kg)麻醉,去卵巢静止和去卵巢振动组大鼠从背部切除双侧卵巢,假手术组不切除卵巢,而将卵巢旁与卵巢等大的脂肪组织切除.手术后休息10周,进行1周的适应性训练,第12周开始正式运动,振动频率90Hz,振幅0.5mm,加速度3.8g,持续15min,每天振动两次,每周7天.振动7周后,腹主动脉取血处死大鼠,无菌条件下取左侧股骨,除去表面的软组织,咬除股骨两端,用预先吸入2ml培养液的注射器冲洗骨髓腔,将冲洗液置于刻度离心管中,1 000rpm离心6min.小心弃上清,一部分置于-40℃保存用于蛋白提取,另一部分用2ml含10%胎牛血清的完全培养液悬浮,吹打成单细胞悬液,计数并调整细胞浓度为5×105/ml,将细胞接种于35mm培养板中,放入5%CO2、37℃的培养箱内培养,培养第9天时,收集细胞提取蛋白.实验数据采用SPSS16.0软件进行统计,结果以均值±标准差表示,进行单因素方差分析,P<0.05为具有显著性差异.结果:各组PPARγ蛋白在全骨髓细胞和骨髓基质干细胞的表达均无显著差异(全骨髓细胞:假手术组0.61 ±0.02,去卵巢静止组0.64±0.04,去卵巢振动组0.60 ±0.01;骨髓基质干细胞:假手术组0.72±0.028,去卵巢静止组0.73 ±0.04,去卵巢振动组0.77±0.04).与假手术组比较,去卵巢静止组P-GSK-3β蛋白在全骨髓细胞和骨髓基质干细胞的表达均显著降低(全骨髓细胞:假手术组0.16±0.01,去卵巢静止组0.12±0.02;骨髓基质干细胞:假手术组0.91±0.10,去卵巢静止组0.82±0.03);与去卵巢静止组比较,去卵巢振动组P-GSK-3β蛋白在全骨髓细胞的表达显著增加(去卵巢静止组0.12±0.02,去卵巢振动组0.21 ±0.01),在骨髓基质干细胞中的表达无显著差异(去卵巢静止组0.82±0.03,去卵巢振动组0.84±0.01).结论:全身垂直振动能促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,但其效应在体外培养后消失.