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目的：克隆HEV-ORF-2基因，构建酵母整合型表达质粒，在巴斯德毕赤酵母表达系统里表达，并对发酵工艺进行优化。
方法：从戊肝病毒基因库中，用PCR方法获取目的基因，克隆至表达载体pPIC9和pPICZαB，并转化至毕赤酵母宿主菌GS115，KM71H，通过实验确定最佳发酵条件，
结果：应用RT-PCR方法成功扩增到约1.65 kb的DNA条带。获得ORF-2 aa 113-658，ORF-2 aa 113-660的目的基因片段，在巴斯德毕赤酵母表达系统里表达。
结论：已成功构建了表达。HEV-ORF-2编码蛋白的巴斯德毕赤酵母工程菌，HEV ORF-2 113-660aa，HEV ORF-2 113-658aa在毕赤酵母中获得了高效、分泌性表达。